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Naturemethods:高通量深度測序法探測RNA結構
...是爲反式作用因子提供特異的結合位點。RNA轉錄物是一種單鏈分子,當其發生自身摺疊並形成Watson-Crick鹼基對,可生成各種長度和不同複雜性的髮夾結構。髮夾結構是RNA中最普通的二級結構形式,其進一步組裝則形成了複雜的三...
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第十八章 診斷分子生物學基本技術--第一節 概述
...,以此類推成百上萬的核苷酸結合可形成一條大分子核酸單鏈,單鏈之間的鹼基再以氫鍵結合可形成較穩定的核酸大分子雙鏈結構(二級結構)。 核酸的簡寫方式爲5′AGCTGTAC3′,此外的英語字母已不代表鹼基,而是指核苷...
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第二十三章 DNA重組技術及其在基因診斷中的應用--第一節 工具酶
...酶的切割可以有兩種方式。一是交錯切割,結果形成兩條單鏈末端,這種末端的核苷酸順序是互補的,可形成氫鍵,所以稱爲粘性末端。如EcoRI的識別順序爲: ↓|5’……GAA|TTC……3’3’...
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第二節 核酸分子雜交法
...斷的重組DNA技術。基本原理是具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下(適宜的溫度及離子強度等)可按鹼基互補原則形成雙鏈,此雜交過程是高度特異的。雜交的雙方是待測核酸及探針。待測核酸序列爲性病病原體基因組...
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分子雜交技術
...記探針和非放射性標記探針;根據是否存在互補鏈,可分爲單鏈和雙鏈探針;根據放射性標記物摻入情況,可分爲均勻標記和末端標記探針。下面將介紹各種類型的探針及標記方法。 一、雙鏈DNA探針及其標記方法 分子生物研...
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5-1-2參與DNA複製的有關物質
螺旋酶(Helicase)單鏈DNA結合蛋白(SSBP)DNA拓撲異構酶(DNATopisomerase)引物酶(Primase)和RNA聚合酶(RNAPolymerase) DNA複製實際上就是DNA指導的DNA合成代謝。因此,必須有DNA作爲複製的模板。體外複製實驗證明,新合成DNA的特...
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常用的分子生物學基本技術簡介
...突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的溫室度及離子強度等)可按鹼基互補原成雙鏈。雜交的雙方是待測核酸序列及探針(probe),待測核酸序列可以是克隆的基因徵段,也可以是未...
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3-3病毒與蛋白質感染因子
...±DNA→+mRNA→蛋白質,如天花病毒、T-偶數噬菌體。 2)單鏈+DNA→±DNA→+RNA→蛋白質。 3)雙鏈±RNA→+mRNA→蛋白質[3],如呼腸孤病毒。 4)單鏈+RNA→-RNA→+RNA→蛋白質脊髓灰質炎病毒。 5)單鏈-RNA→+RNA→+蛋白質,如流感...
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生物物理所劉迎芳課題組在抗病毒蛋白結構與功能研究方面取得新進展
...能也通過該區域結合核酸。我們設計了不同序列和長度的單鏈、雙鏈的DNA和RNA,通過凝膠遷移實驗(EMSA)研究了ISG58對核酸序列的選擇性。EMSA的結果顯示:ISG58和ISG54不同,它傾向於結合不同長度的單鏈RNA和雙鏈DNA片段。相比較I...
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長春應化所在化學生物學生物分子識別領域取得可喜進展
...基酸Val的配合物可促進在體內複製及轉錄具有重要功能的單鏈prA及polydA產生二級結構;目前針對人類單鏈RNA聚合酶PAP爲靶點的單鏈核酸藥物報道很少,這些實驗結果對單鏈核酸藥物設計及揭示稀土生物學效應具有指導作用。(FEBSL...
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中國科學院2003年攻讀碩士學位研究生入學試題《生物化學與分子生物學》卷
....是非題(共25分)1.多肽鏈的共價主鍊形式可以是雙鏈或單鏈()2.分子量相同的兩種蛋白質,如分子中酪氨酸和色氨酸殘基數亦相同,,其摩爾消光係數可能不同()3.胰島素元的降血糖活性是胰島素的1/10左右()4.苯丙氨酸是...
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RNA也有雙螺旋結構
...RNA)發揮着中介作用。RNA是一種可在細胞核糖體內發現的單鏈遺傳物質。雖然其在通常情況下是單鏈的,但是某些RNA序列也能像DNA一樣形成雙螺旋結構。1961年,亞歷山大·裏奇、大衛·戴維斯、沃森以及克里克提出假說,被稱爲p...
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生物計算未來
...相似之處。 DNA由GTAC四種鹼基構成,在其中的每一條單鏈上,鹼基的順序可以看做是隨意的;而如果一條單鏈上某個位置的鹼基是腺嘌呤A的話,另一條單鏈的對應位置上則必然是胸腺嘧啶T;鳥嘌呤G和胞嘧啶C也存在同樣的對...
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分子生物學實驗基礎知識
...、擴增、表達的工具。載體有質粒(plasmid)、噬菌體、單鏈絲狀噬菌體和粘性末端質粒(粘粒)、病毒等。載體具有能自我複製;有可選擇的,便於篩選、鑑定的遺傳標記;有供外源DNA插入的位點;本身體積小等特徵。 質...
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第二節 分子生物學實驗基礎
...、擴增、表達的工具。載體有質粒(plasmid)、噬菌體、單鏈絲狀噬菌體和粘性末端質粒(粘粒)、病毒等。載體具有能自我複製;有可選擇的,便於篩選、鑑定的遺傳標記;有供外源DNA插入的位點;本身體積小等特徵。 質...
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第十八章 核酸分子雜交技術概述--第一節 核酸的分子結構
...核苷酸依3’,5’磷酸二酯鍵形成的多核苷酸鏈。RNA總是以單鏈的形式存在,也有5’磷末端及3’羥基末端。RNA單鏈的局部摺疊成的某一片段的A及G分別與另一片段的U及C配對常形成髮夾結構(hairpinstructure)。在此結構內的鹼基無...
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英在地球早期環境模擬條件下合成類RNA
...由鹼基、核糖和磷酸組成。DNA具有雙螺旋的複雜結構,而單鏈的RNA在結構上更爲簡單和牢固。因此有學者認爲,DNA過於複雜,不可能在瞬間突然出現。在生命最初產生時,DNA的單鏈“表親”———RNA要先於DNA出現,是地球上最早...
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2-2-6核酸的變性和復性
...是及不可能的,核酸實驗中經常以此方式保持DNA的變性(單鏈)狀態。這說明降溫時間太短以及溫差大均不利於復性。 DNA濃度。復性的第一步是兩個單鏈分子間的相互作用“成核”。這一過程進行的速度與DNA濃度的平方成正...
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第三節 分子生物學實驗診斷技術
...imer或sense,人工合成),DNA多聚酶可識別並結合引物,以單鏈DNA爲模板,dNTP爲底物,合成其互補鏈。通過反覆變性,反覆合成互補鏈的過程,達到DNA擴增的目的。人的DNA擴增引物長度多爲20個核甘酸。(圖18-7)圖18-7 PCR技術原...
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DNA電鏡技術及其應用
...展狀態。將變性劑(如甲酰胺等)加入展開液中,可以防止單鏈DNA分子內鹼基非隨機配對。細胞色素C展層技術不僅可以用於觀察雙鏈DNA分子(dsDNA),也可用於觀察單鏈DNA分子(ssDNA),此時該方法也可稱甲酰胺展層技術。展開液(上相液...
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廈門大學生科院等miRNA研究成果發表於《Immunity》
...SC)。RISC通過Dicer中解旋酶的作用將雙鏈RNA變成兩個互補的單鏈RNA,然後單鏈RNA識別細胞內與其互補的靶RNA分子,並與之互補結合,這時Dicer中的核酸內切酶將RNA分子切斷,從而使靶RNA分子失去編碼蛋白質的功能。植物、線蟲、動...
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2-2生物化學與分子生物學技術
...起來的一種技術。其原理是,具有互補核苷酸序列的兩條單鏈核苷酸分子片段,在適當條件下,通過氫鍵結合,形成DNA-DNA,DNA-RNA或RNA-RNA雜交的雙鏈分子。這種技術可用來測定單鏈分子核苷酸序列間是否具有互補關係。 (一...
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實驗室常用技術參數資料(一)
...g (2)分光光度換算: 1A260雙鏈DNA=50μg/ml 1A260單鏈DNA=30μg/ml 1A260單鏈RNA=40μg/ml (3)DNA摩爾換算: 1μg100bpDNA=1.52pmol=3.03pmol末端 1μgpBR322DNA=0.36pmol 1pmol1000bpDNA=0.66μg 1pmolpBR322=2.8μg 1kb雙鏈DNA(鈉...
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PCR-SSCP技術
...用. 一、SSCP的原理及特點 日本Orita等研究發現,單鏈DNA片段呈複雜的空間摺疊構象,這種立體結構主要是由其內部鹼基配對等分子內相互作用力來維持的,當有一個鹼基發生改變時,會或多或少地影響其空間構象,使構...
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RNA干擾作用原理及其應用
...電有利於與RNA帶負電的磷酸骨架結合。siRNA解旋後,siRNA單鏈的3‘端伸入PAZ的裂縫中,整個單鏈沿着PAZ伸展開,同時目的片段mRNA結合於新月型底座。mRNA與siRNA互相配對形成雙鏈後,在離單鏈siRNA5‘端9個鹼基處(即離siRNA3‘端11-12...
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2-1-2病毒基因組的結構和功能
...共存於同一病毒顆粒中。組成病毒基因組的DNA和RNA可以是單鏈的,也可以是雙鏈的,可以是閉環分子,也可以是線性分子。如乳頭瘤病毒是一種閉環的雙鏈DNA病毒,而腺病毒的基因組則是線性的雙鏈DNA,脊髓灰質炎病毒是一種單...
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轉基因技術讓蚊子不再傳染登革熱
...毒的能力。 據介紹,通常的RNA(核糖核酸)病毒都是單鏈結構,但登革熱病毒在生命週期中存在着一個短暫的RNA(核糖核酸)雙鏈時期,科研人員就是利用了這一弱點去除了病毒的活性。在這個短暫的雙鏈時期中,可以用dic...
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第三節 DNA的二級結構與功能
...復存在(圖15-7)。進一步的分析還證明,Z-DNA的形成是DNA單鏈上出現嘌呤與嘧啶交替排列所成的。比如CGCGCGCG或者CACACACA。圖15-7 Z-DNA和B-DNA Z-DNA有什麼生物學意義呢?應當指出Z-DNA的形成通常在熱力學上是不利的。因爲Z...
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天津大學2002年招收攻讀碩士研究生入學試題生物化學
...抗劑;(4)阿糖胞苷11.下列與DNA解鏈無關的是()(1)單鏈DNA結合蛋白;(2)DNA酶;(3)DNA旋轉酶;(4)拓撲異構酶II12.下列關於癌變的論述,哪一項是正確的()(1)有癌基因的細胞便會轉變爲癌細胞;(2)一個癌基因的...
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核酸檢測的革命:可替代PCR的犀利技術
...應。RPA技術的基本原理RPA技術主要依賴於三種酶:能結合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性,最佳反應溫度在37°C左右。ViaFect轉染試劑重組酶與...