5 別名
FFA,非脂化脂肪酸
6 血清遊離脂肪酸醫學檢查
6.1 化驗取材
6.2 化驗方法
脂類測定
6.3 化驗類別
6.4 取材
6.5 原理
(1)
(2)
(3)
6.6 試劑
以Boehringer mannheim遊離脂肪酸測定試劑盒爲例:
(1)緩衝液Ⅰ:0.2mol/L pH7.5 KH2PO4(用5mol/L KOH調pH)。
(2)81mol/L ATP溶液:125mg ATP溶於2.5ml緩衝液Ⅰ中。
(3)10mmol/L MgCl2溶液。
(5)50g/L Triton X-100溶液。
(7)2-(N-嗎啉代)乙烷磺酸(2-morpholi-noethanesulphonic acid,MES)緩衝液:0.2mol/L,pH7.5(用KOH調pH)。
(8)N-乙基順丁烯二酰亞胺(N-ethylmaleimide,NEM),20mmol/L(用MES緩衝液配製)。
(9)4-氨基安替比林溶液,15mmol/L(用MES緩衝液配製)。
(10)2,4,6-三溴-3-羥基苯甲酸(TBHB)溶液60mmol/L(用MES緩衝液配製)。
(12)1g/L NaN3溶液
(13)酰基輔酶A氧化酶溶液:約120u/ml(用緩衝液Ⅰ配製)。
6.7 操作方法
(1)混合試劑:
①試劑Ⅰ:含緩衝液Ⅰ 4.0ml、ATP 2.0ml、MgCl2 2.0ml、輔酶A 2.0ml、TritonX-100 4.0ml、酰基輔酶A合成酶2.0ml,加雙蒸水4.5ml(共20.5ml)。
②試劑Ⅱ:含MES緩衝液10.0ml、4-氨基安替比林6.0ml、TBHB 8.0ml、NaN3溶液2.0ml、TritonX-100 4.0ml、過氧化物酶溶液0.4ml,雙蒸水10.0ml(共40.4ml)。
③試劑Ⅲ:NEM緩衝液2.1ml、酰基輔酶A氧化酶2.0ml(共4.1ml)。
(2)各管內加入試劑Ⅰ1ml與試劑Ⅱ2ml,混合,37℃10min。
(3)加入空白與血清標本各50μl,混合後37℃5min,在546nm測定吸光度爲A1。
(4)加入試劑Ⅲ 0.20ml,混合,待20~25min反應停止後在546nm測定吸光度爲A2。
6.8 正常值
酶法(37℃):400~900μmol/L。
6.9 化驗結果臨牀意義
(1)升高:糖尿病、糖原累積病、甲狀腺功能亢進症、褐色細胞瘤、肢端肥大症、巨人症、庫欣綜合徵、重症肝損害、心肌梗死、妊娠後期、阻塞性黃疸、肝炎、肝硬化、血色病等。
(2)降低:甲狀腺功能減低症、艾迪生病、胰島細胞瘤、腦垂體功能減退症、降糖藥或胰島素使用過量等。
6.10 附註
若血清遊離脂肪酸濃度大於2mmol/L可適當稀釋後再測。