1 概述
目前TG的測定方法有酶法與化學法，酶法又有一步終點法與兩步終點法，兩步終點法其主要優點是能夠去除遊離甘油的干擾。近年來，人們對高甘油三脂血癥在動脈硬化中意義的認識正在加深。測定甘油三脂對了解血脂代謝、肝功能（肝臟是合成甘油三脂器官之一）以及動脈粥樣硬化引起的疾病的診斷都有幫助。
3 血清甘油三脂的醫學檢查
3.1 檢查名稱
3.2 分類
3.3 取材
3.4 血清甘油三脂的測定原理
用高效的微生物脂蛋白脂肪酶（LPL）使血清中TG水解成甘油與脂肪酸，將生成的甘油用甘油激酶（GK）及三磷酸腺苷（ATP）磷酸化，以磷酸甘油氧化酶（GPO）氧化3-磷酸甘油（G-3-P），然後以過氧化物酶（POD）、4-氨基比林（4-AAP）與4-氯酚（三者合稱PAP）顯色，測定所生成的H2O2，故本法簡稱GPO-PAP法，反應如下：
目前國內外多數TG商品試劑根據上述原理配製，用一步終點法測定。此法的主要缺點是測定結果包括血清中的遊離甘油（FG）。爲了去除FG的干擾，有二種方法：①外空白法，即同時用不含LPL的酶試劑測定FG作爲空白值，此法的缺點是需要作雙份測定，試劑成本加倍，混濁的高TG標本會產生負干擾，優點是可以同時得出FG數據。②內空白法（兩步法、雙試劑法）即試劑分兩步加入的預孵育法，將前述GPO-PAP試劑分成兩部分，其中LPL和4-AAP組成試劑Ⅱ，其餘部分組成試劑Ⅰ。血清加試劑Ⅰ，37℃孵育後，因無LPL存在，TG不被水解，FG在GK和GPO作用下反應生成H2O2，但因反應體系中不含4-AAP，不能完成顯色反應，由此除去FG的干擾，再加入試劑Ⅱ，測出TG水解生成的甘油。此法不增加費用，手工操作多加一步試劑，並能輸入絕大部分型號的自動生化分析儀。操作更簡單，且精密度和準確度均較好。
3.5 試劑
（1）一步法：單一試劑組成如下（衛生部老年醫學研究所配方）：
Tris-HCl緩衝液，pH7.6 150mmol/L
LPL（假單胞菌屬） ≥3000U/L
GK（念珠菌屬） ≥250U/L
ATP ≥0.5mmol/L
GPO（足球菌屬） ≥3000U/L
POD（辣根） ≥1000U/L
膽酸鈉 3.5mmol/L
MgSO4·7H2O 17.5mmol/L
4-AAP 1mmol/L
4-氯酚 3.5mmol/L
Tritonx-100 0.1g/L
除緩衝液外，其他爲混合的乾粉，也有配成液體的。
（2）兩步法：雙試劑組成如下（寧波市臨牀檢驗中心配方）：
①Tris-HCl緩衝液，150mmol/L，pH7.6，每升中含MgSO410mmol，膽酸鈉3.5mmol，ATP 1mmol，4氯酚2.5mmol，TritonX-100 0.1g；
②酶液Ⅰ：上述Tris緩衝液50ml中溶入GK500U，GPO 3000U，POD 1000U；
③酶液Ⅱ：上述Tris緩衝液50ml中溶入LPL 3000U，4-AAP 1mmol；
④手工法應用試劑Ⅰ：酶液Ⅰ 5ml與Tris緩衝液45ml混合；
⑤手工法應用試劑Ⅱ：酶液Ⅱ5ml與Tris緩衝液45ml混合。
用於自動分析時，試劑Ⅰ、Ⅱ的用量隨儀器調整，但緩衝液與酶液Ⅰ和酶液Ⅱ的最終比例9∶0.5∶0.5不變。
（3）參考物（標準液）：2mmol/L三油酸酯水溶液。精確稱取三油酸酯（純品）177mg（可直接稱入100ml容量瓶中），加Triton X-100 5ml，搖動使成乳濁狀，置56℃水浴約10min，澄清後加蒸餾水90ml，冷卻至室溫，再加蒸餾水至刻度，混勻。以2ml安瓿分裝，4℃保存至少穩定2年，切勿冰凍。
目前不少一步法試劑盒以甘油（純品）水溶液爲參考物（甘油20.8mg/dl，相當於TG2.26mmol/L即200mg/dl），其缺點是未參加反應全過程，不適用於兩步法。一步法中只要LPL能完全水解TG，用甘油或三油酸酯爲標準結果一致。
3.6 操作方法
取血前兩天內不要進食含大量脂肪的食品，早晨空腹（12h）取血。標本存放中會有少量TG水解，釋出甘油，一般主張在4℃存放不宜超過3天。
（1）一步法：測定管、標準管與空白管中分別加入血清、標準液及蒸餾水各10μl，酶試劑各1.00ml，37℃，10min後用光度計測吸光度（A），波長500nm，顏色至少可穩定1h。
血清TG（mmol/L）＝（測定管A/標準管A）×標準液TG濃度（mmol/L）
（2）兩步法：測定管、標準管與空白管中分別加入血清、標準液及蒸餾水各10μl，各加應用試劑Ⅰ 0.5ml，混勻，37℃水浴5min，然後再各加應用試劑Ⅱ 0.5ml，混勻後37℃水浴10min，空白管校零，在波長500nm測吸光度（A），計算同一步法。
3.7 正常值
正常人TG水平高低受生活條件的影響，我國人低於歐美人，成年以後隨年齡上升。TG水平的個體內與個體間差異都比TC大，人羣調查的數據比較分散，呈明顯正偏態分佈。營養良好的中、青年平均值以去除FG計約0.90～1.00mmol/L（80～90mg/dl），老年前期與老年人平均超過1.13mmol/L（100mg/dl），95百分位數在中青年約爲1.69mmol/L（150mg/dl），老年約爲2.26mmol/L（200mg/dl）。
美國國家膽固醇教育計劃對空腹TG水平劃分界限的修訂意見（1993）是：
TG正常：＜2.3mmol/L（＜200mg/dl）；
TG增高的比緣：2.3～4.5mmol/L（200～400mg/dl）；
高TG血癥：＞4.5mmol/L（＞400mg/dl）；
胰腺炎高危：＞11.3mmol/L（＞1000mg/dl）。
3.8 化驗結果臨牀意義
高TG血癥也有原發的與繼發的兩類，其中包括家族性高TG血癥與家族性混合型高脂（蛋白）血癥等。繼發的見於糖尿病、糖原累積病、甲狀腺功能不足、腎病綜合徵、妊娠、口服避孕藥、酗酒等，但不易分辨原發或繼發。高血壓、腦血管病、冠心病、糖尿病、肥胖與高脂蛋白血癥等往往有家族性集聚現象，其間可能有因果關係，但也可能僅僅是伴發現象；例如糖尿病患者胰島素與糖代謝異常可繼發TG（或同時有TC）升高，但也可能同時有糖尿病與高TG兩種遺傳因素。冠心病患者TG偏高的比一般人羣中多見，但這種患者LDL-C偏高與HDL-C偏低也多見。一般認爲單獨有高TG不是冠心病的獨立危險因素，只有伴以高TC、高LDL-C、低HDL-C等情況時纔有病理意義。
通常將高脂蛋白血癥分爲Ⅰ、Ⅱa、Ⅱb、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ等6型，除Ⅱa型以外都有高TG：①Ⅰ型是極爲罕見的高CM血癥，原因有二，一爲家族性LPL缺乏症，一爲遺傳性的apoCⅡ缺乏症。②最常見的是Ⅳ型，其次是Ⅱb型，後者同時有TC與TG增高，即混合型高脂蛋白血癥；Ⅳ型只有TG增高，反映VLDL增高，但是VLDL很高時也會有TC輕度升高，所以Ⅳ型與Ⅱb型有時難於區分，主要根據LDL-C水平作出判斷。家族性高TG血癥屬於Ⅳ型。③Ⅲ型又稱爲異常β脂蛋白血症，TC與TG都高，其比例近於1∶1（以mg/dl計），但無乳糜微粒血癥。診斷還有賴於：脂蛋白電泳示寬β帶；血清在密度1.006g/ml下超速離心後，其頂部（VLDL）作電泳分析證明有漂浮的β脂蛋白或電泳遷移在β位的VLDL存在，化學分析示VLDL-C/血清TG＞0.3或VLDL-C/VLDL-TG＞0.35；apoE分型多爲E2/E2純合子。④Ⅴ型爲乳糜微粒和VLDL都增多，TG有高達10g/L以上的，這種情況可以發生在原有的家族性高TG血癥的基礎上，繼發因素有糖尿病、妊娠、腎病綜合徵、巨球蛋白血癥等，易引發胰腺炎。
3.9 附註
（1）上述兩步酶法爲中華醫學會檢驗學會的推薦方法（見中華醫學檢驗雜誌，1995，18：249）。現階段允許一步酶法與兩步酶法並存，要求逐步過渡到統一採用兩步法。在未統一方法前，實驗室報告TG測定結果時應註明“去FG值”或“未去FG值”，這將有助於臨牀醫生對結果的正確判斷。
（2）正常人血清TG濃度平均約0.11mmol/L（10mg/dl），對於變動幅度較大的TG來說，由此引起的誤差是可以忽略的，但有此標本中TG明顯增高，以致影響對TG水平的判斷，例如糖尿病、情緒應激、含甘油的藥物、靜脈營養、取血標本時甘油污染等。此外，標本貯存與處理不當會使其中TG水解而產生TG。
（3）內源性TG很高的標本雖然不很多，爲了避免可發生的差錯，國外文獻中的建議可供參考：臨牀實驗室應備有可以去TG空白的試劑，供必要時採用；體檢及門診患者可以不做TG空白，但糖尿病或其他特殊門診例外；TG＞2.3mmol/L者最好作TG空白校正，對有些可疑情況，如高TG而血清不混濁者應排除高TG的可能。