3 概述
人體內的氨是蛋白質代謝過程中通過氨基酸脫氨基，腎臟使谷氨醯胺分解和腸道內細菌的作用而生成。大部分氨在肝內通過鳥氨酸循環合成尿素。一部分被用於酮酸的氨基化，合成谷氨醯胺，在腎內形成銨鹽從尿中排出。血氨在診斷治療肝昏迷、肝性腦病中佔重要地位，尿中氨測定是估價體內酸鹼平衡紊亂的指標之一，血氨的測定方法有離子交換樹脂法、直接法、電極法及酶法，其中酶法以其簡單、特異性高而被廣泛應用。
4 血氨的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 取材
4.4 取材
4.5 血氨的測定原理
在過量α-酮戊二酸、NAD（P）H和足量穀氨酸脫氫脫氫酶（GLDH）條件下，酶促反應的速率，即NAD（P）H轉變成NAD（P）＋使340nm吸光度的下降速率與反應體系中氨的濃度呈正比關係。
4.6 試劑
全部試劑必須用去氨水製備。去氨水用蒸餾水經氫型陽離子交換樹脂處理獲得。
（1）66.7mmol/L KH2PO4溶液：取9.12g KH2PO4溶入去氨水中，定溶到1L，4℃保存。
（2）66.7mmol/L Na2HPO4溶液：取9.51g Na2HPO4溶解並加去氨水到1L，4℃保存。
（3）pH8.0（±0.05），66.7mmol/L磷酸鹽緩衝液（PB）：取5ml“1”液及95ml“2”液，混合，4℃保存，穩定3周。
（4）310mmol/L α-酮戊二酸：取0.45gα-酮戊二酸，溶於5ml去氨水中，用3mol/L氫氧化鈉調pH至接近5.0時，改用0.1mol/L氫氧化鈉調pH至6.8（±0.01），切勿調得過鹼，因高pH可破壞α-酮戊二酸，以去氨水稀釋到10ml，4℃穩定10天；
（5）NADPH貯存液：稱約10mgN-ADPH（－20℃、乾燥器保存）溶於1mlPB中取出50μl，以PB稀釋到5ml爲工作液，以PB調零，1cm光徑，在340nm波長讀NADPH工作液的吸光度，計算NADPH貯存液中實際濃度：
6.22爲NADPH的毫摩爾吸光係數，據上式計算結果確定製備GLDH工作液中加入NADPH貯存液的量，使達到149μmol/L。
（6）GLDH工作液：根據GLDH酶製品（－20℃乾燥器中保存）的比活，稱出酶活力爲992U的相應量（如比活爲50U/mg蛋白，則稱20mg），如GLDH在甘油中，可按U/ml吸出992U的相應體積，置50ml量瓶中，稱入ADP（－20℃，乾燥器中保存）15mg，吸入計算量的NADPH貯存液，以PB稀釋到50ml，4℃保存可穩定7天；
（7）氨標準貯存液，100mmol/L：稱取（NH4）2SO4660.7mg，溶於去氨水定容到100ml，4℃保存；
（8）氨標準應用液：用去氨水分別稀釋貯存液成25、50、100、及150μmol/L。
4.7 操作方法
所用分光光度計需配有37℃恆溫比色系統及340nm波長。如用自動分析儀，可根據本法反應條件自行設計，樣品及試劑用量按比例減少。
操作見表1，按B、S、U管先後順序進行。
混勻，於10s時讀A10s於70s時讀A70s，求各管的△A，即△A＝A10s－A70s。
4.8 正常值
18～72μmol/L。
4.9 化驗結果臨牀意義
正常情況下，氨在肝臟中轉變爲尿素。嚴重肝臟疾病時，氨不能從循環中清除，引起血氨增高。高血氨有神經毒，引起肝性腦病（肝昏迷）。故成人血氨測定主要用於肝昏迷的監測和處理。
此外，血氨測定對兒科診斷Reye綜合徵非常有用。該徵有嚴重低血糖、大塊肝壞死、急性肝衰，並伴有肝脂肪變性，在肝酶譜增高前，即見血氨增高。對診斷某些先天性代謝紊亂，如鳥氨酸循環的氨基酸代謝缺陷（高血氨）也很重要。
4.10 附註
（1）各試劑成分的終濃度：磷酸鹽540mmol/L，α-酮戊二酸10mmol/L，NAD-
PH 120μmol/L，ADP0.5mmol/L，GLDH16U/ml。
（2）酶法測定血漿氨具有特異、簡便、快速等優點，且可上自動分析儀。腺苷二磷酸（ADP）可穩定GLDH，增強反應速率。NADPH作輔酶較NADH可縮短反應時間，但前者價格更貴。
（3）血漿中LDH、AST等也可利用NAD（P）H而產生內源性的消耗，直接影響血漿氨測定結果，起動劑α-酮戊二酸加入前37℃加溫10min爲NAD（P）H內源性消
耗反應時間。
（4）血漿氨測定的準確性在很大程度上取決於標本收集是否符合要求。用EDTA·Na2抗凝，靜脈採血與抗凝劑充分混勻後立即置冰水中，儘快分離血漿，加塞置2～4℃保存，在2～3h內分析；－20℃可穩定24h，顯著溶血者不能用，因紅細胞中氨濃度爲血漿的2.8倍。
（5）線性範圍0～150μmol/L，日常工作中可僅用100μmol/L標準應用液。
（8）國內已有血漿氨酶法測定試劑盒，請按介紹操作。如中生公司的試劑盒，用三乙醇胺緩衝液，NADPH作輔酶，NADPH內源性消耗反應在室溫中需反應20min。