3 概述
纖連蛋白爲一族高分子糖蛋白,由間吐細胞分泌,廣泛分佈於人體細胞表面和血漿中。有促進巨噬細胞的吞噬功能,促進細胞與纖維基質間連接的生理作用。纖連蛋白與機體創傷修復、組織炎症、纖維化及硬化過程等有密切關係。纖連蛋白也是一種重要的調理素,對嚴重疾病的診斷有重要價值。
5 纖維連接蛋白的醫學檢查
5.1 檢查名稱
5.2 分類
5.3 取材
5.4 纖維連接蛋白的測定原理
在含抗Fn血清的瓊脂凝膠板上打孔,加樣,樣品中的Fn在瓊脂凝膠中擴散,與抗Fn結合形成沉澱環,其直徑與Fn含量的對數成直線關係,可根據標準曲線,求樣品中Fn含量。
5.5 試劑
(1)0.05mol/L pH8.2巴比妥鈉-HCl緩衝液:巴比妥鈉15.8g加水至1000ml,以1.17mol/L HCl調pH至8.2,約需1.17mol/L HCl(濃HCl 19.3ml加水180.7ml)18.36ml,最後以蒸餾水補足至1421.8ml。
(2)9g/L NaCl溶液。
(3)24.0g/L瓊脂:優質瓊脂粉2.4g,疊氮鈉0.1g,加0.05mol/L pH8.2巴比妥鈉-HCl緩衝液100ml,加熱融化後,根據澆板時板的大小分裝、保存。
(4)Fn抗血清(上海生物製品研究所提供),效價1∶100。
5.6 操作方法
將抗血清用9g/L NaCl稀釋成1∶50濃度,加熱至56℃,同時將用pH8.2巴比妥鈉鹽酸緩衝液配製的24.0g/L瓊脂糖加熱溶解,降溫至56℃,同抗血清等量混合,澆注成1.5mm厚的凝膠板,凝固後打孔,孔徑3mm,孔距15mm。被檢血清用9g/L NaCl稀釋2倍,各取10μl分別加入孔中,同時按介紹建立標準曲線。水平放置於溼盒內,再將溼盒放入37℃溫箱內48h,最後取出凝膠板,測沉澱環直徑,根據標準作出Fn含量對沉澱環直徑平方的迴歸直線方程,計算出各份血清的Fn含量,乘以稀釋倍數,即爲被檢血清的Fn值。
5.7 正常值
單向免疫擴散法:0.231±0.046g/L (231±46μg/ml)。
5.8 化驗結果臨牀意義
降低:多器官衰竭、嚴重感染、重症肝炎、失代償性肝硬化、肝癌轉移、嚴重營養不良。