3 基本信息
ICS 11.020
C59
備案號：17598—2006
中華人民共和國衛生行業標準WS 260—2006《絲蟲病診斷標準》（Diagnostic criteria for filariasis）由中華人民共和國衛生部於2006年04月07日發佈，自2006年12月01日起實施，GB 15985—1995《絲蟲病診斷標準及處理原則》作廢。
4 發佈通知
衛通〔2006〕7號
現發佈《包蟲病診斷標準》等5項標準爲強制性行業標準,《尿中碘的砷鈰催化分光光度測定方法》爲推薦性行業標準,其編號和名稱如下:
強制性行業標準:
WS 257—2006包蟲病診斷標準
WS 258—2006黑熱病診斷標準
WS 259—2006瘧疾診斷標準
WS 260—2006絲蟲病診斷標準
WS 261—2006血吸蟲病診斷標準。
推薦性行業標準:
WS/T 107—2006尿中碘的砷鈰催化分光光度測定方法(代替WS/T 107—1999)
以上標準於2006年12月1日起實施。自實施之日起，WS/T 107—1999廢止。
特此通告。
2006年4月7日
5 前言
本標準是在GB 15985—1995《絲蟲病診斷標準及處理原則》的基礎上制定的，GB 15985—1995作廢。
本標準的附錄B、C是規範性附錄，附錄A是資料性附錄。本標準由全國地方病寄生蟲病標準委員會提出。
本標準由中華人民共和國衛生部批准。
本標準起草單位：中國疾病預防控制中心寄生蟲病預防控制所、山東省寄生蟲病防治研究所、江蘇省寄生蟲病防治研究所、湖南省疾病預防控制中心、福建省疾病預防控制中心。
本標準主要起草人：孫德建、伍衛平、鄧緒禮、孫風華、段績輝、楊發柱、陳錫欣。
絲蟲病診斷標準
7 2 術語和定義
下列術語和定義適用於本標準。
2.1 絲蟲病 filariasis
是由絲蟲成蟲寄生於人體所引起的寄生蟲病，在我國特指淋巴絲蟲病，包括班氏絲蟲病和馬來絲蟲病。
2.2 微絲蚴血癥 microfilaremia受檢者血內含有微絲蚴。
2.3 急性絲蟲病 acute filariasis
因感染絲蟲而引起的急性臨牀表現，如非細菌感染性淋巴結炎／淋巴管炎和／或精索炎、睾丸炎、附睾炎等，常反覆發作。患者常無微絲蚴血癥。
2.4 慢性絲蟲病 chronic filariasis
8 3 診斷依據
8.1 3.1 流行病學史
居住在絲蟲病流行區，或者有傳播季節在流行區居住史（參見附錄A）。
8.2 3.2 臨牀表現（參見附錄A）
馬來絲蟲病的臨牀表現限於肢體，而班氏絲蟲病除肢體外還累及泌尿生殖系統。
8.2.1 3.2.1 急性絲蟲病
急性絲蟲病表現爲淋巴結炎／淋巴管炎和／或精索炎、睾丸炎、附睾炎等，常反覆發作。
8.2.2 3.2.2 慢性絲蟲病
慢性絲蟲病的主要臨牀表現有淋巴水腫／象皮腫、乳糜尿和鞘膜積液。
8.3 3.3 實驗室檢測
8.3.1 3.3.1 病原學檢測
血液檢查微絲蚴或淋巴液、鞘膜積液、乳糜尿內微絲蚴的檢查及病理組織學檢查（見附錄B）。
8.3.2 3.3.2 血清學檢測
10 5 診斷標準
10.1 5.1 微絲蚴血癥
5.1.1 傳播季節流行區居住史。5.1.2 血液檢查微絲蚴陽性。確診依據：具備5.1.1和5.1.2。
10.2 5.2 急性絲蟲病
5.2.1 傳播季節流行區居住史。
5.2.2 有非細菌感染性淋巴結炎／淋巴管炎和／或精索炎、睾丸炎、附睾炎等臨牀表現，並排除其他病因。
5.2.3 快速免疫色譜試驗（ICT）檢測班氏絲蟲抗原陽性或ELISA檢測絲蟲特異IgG4抗體陽性。5.2.4 血液檢查微絲蚴陽性或微絲蚴陽性史。
臨牀診斷病例：應同時具備5.2.1和5.2.2，或兼有5.2.3。確診病例：臨牀診斷病例加5.2.4。
10.3 5.3 慢性絲蟲病
5.3.1 長期流行區居住史。
5.3.2 有符合絲蟲病發病特點和規律的淋巴水腫／象皮腫、鞘膜積液或乳糜尿等臨牀表現，並排除其他病因，或兼有5.2.2的表現。
5.3.3 快速免疫色譜試驗（ICT）檢測班氏絲蟲抗原陽性或ELISA檢測絲蟲特異IgG4抗體陽性。
5.3.4 病原學檢查陽性（含血檢微絲蚴或淋巴液、鞘膜積液、乳糜尿內微絲蚴檢查和活體組織檢查）或病原學檢查陽性史。
臨牀診斷病例：應同時具備5.3.1和5.3.2，或兼有5.3.3。確診病例：臨牀診斷病例加5.3.4。
11 6 鑑別診斷
6.1 絲蟲病急性淋巴結炎／淋巴管炎和／或精索炎、睾丸炎、附睾炎應與細菌性淋巴結炎／淋巴管炎和／或結核性精索炎、睾丸炎、附睾炎鑑別。
6.2 絲蟲病淋巴水腫／象皮腫應與細菌感染性、先天性、家族性及淋巴結摘除術等引起的相似症狀鑑別。
12 附錄A（資料性附錄）流行病學及臨牀表現
12.1 A.1 流行病學
A.1.1 分佈：絲蟲病流行於熱帶、亞熱帶和溫帶地區，其中班氏絲蟲病廣泛分佈於業洲、非洲和拉丁美洲，馬來絲蟲病僅分佈於亞洲。我國的絲蟲病分佈於中部和南部的山東、河南、安徽、汀蘇、湖北、上海、浙江、江西、福建、廣東、海南、廣西、湖南、四川、重慶和貴州等16個省（自治區、直轄市）及臺灣省，其中山東、海南、重慶和臺灣爲單一班氏絲蟲病流行區，四川爲單一馬來絲蟲病流行區，其餘各省（自治區、直轄市）班氏和馬來兩種絲蟲病均有流行。
A.1.2 流行環節：絲蟲病的傳染源爲微絲蚴血癥者。在我國，班氏絲蟲病的主要傳播媒介是淡色庫蚊和致倦庫蚊，馬來絲蟲病的主要傳播媒介是嗜人按蚊和中華按蚊。人對絲蟲普遍易感。
A.1.3 傳播季節：絲蟲病的傳播季節即其主要蚊媒的活動季節。在熱帶和亞熱帶地區，蚊蟲終年活動，全年或多數月份可傳播。在溫帶地區，傳播季節在5月中旬至10月間，因緯度而異。
12.2 A.2 臨牀表現
12.2.1 A.2.1 急性絲蟲病
A.2.1.1 淋巴結炎／淋巴管炎：肢體淋巴結炎／淋巴管炎好發部位爲腹股溝和股部淋巴結，腋下和肘部淋巴結受侵較少，發作時一般有畏寒和局部淋巴結不適等先兆症狀，隨即局部淋巴結腫大，並出現淋巴管炎和患肢遠端毛細淋巴管炎（丹毒樣皮炎），局部紅腫、疼痛和觸痛，有溫熱感。全身症狀有不同程度的發熱、頭痛和不適，病程一般3d～5d，嚴重者體溫升至39℃以上，病程長至1周。絲蟲病淋巴結炎／淋巴管炎的特點是炎症發展從局部淋巴結炎開始，呈離心性，與細菌感染引起的淋巴管炎通常從感染病竈開始呈向心性者不同。急性馬來絲蟲病症狀侷限於肢體，急性班氏絲蟲病除肢體外還可發生腹部和盆腔等深部淋巴結炎／淋巴管炎，表現爲發熱、寒戰和腹痛等。
A.2.1.2 精索炎、睾丸炎、附睾炎：是班氏絲蟲病急性期的臨牀表現之一。常驟然發病，出現寒戰、高熱、單或雙側腹股溝或陰囊持續性疼痛，並放射至附近器官和腹部，易被誤診爲急腹症。發病時精索粗厚、附睾和睾丸腫大，精索、睾丸和附睾表面出現腫塊。病程一般3d～5d。隨炎症消退，腫塊變硬並逐漸縮小成黃豆或綠豆大的堅韌結節。結節1至數個，有的岡此呈串珠樣。
12.2.2 A.2.2 慢性絲蟲病
A.2.2.1 淋巴水腫／象皮腫：班氏絲蟲病淋巴水腫／象皮腫的好發部位爲肢體、外生殖器的陰囊、陰莖和陰脣以及女性乳房，而馬來絲蟲病淋巴水腫／象皮腫僅限於肢體。以下肢淋巴水腫／象皮腫爲例，班氏絲蟲病常波及全下肢，馬來絲蟲病則限於膝關節以下。絲蟲病淋巴水腫／象皮腫是在急性淋巴結炎／淋巴管炎反覆發作的基礎上逐漸形成的。淋巴水腫和象皮腫足病程發展的兩個階段。在發病初期，淋巴水腫可隨急性炎症的消退而消失，如急性炎症發作較劇較頻，則局部淋巴水腫持續不消，並致皮膚異常粗厚而發展成象皮腫。嚴重的象皮腫可出現深溝皺褶、肉刺和疣狀增生、苔蘚樣變等。肢體淋巴水腫／象皮腫可單側或雙側，但不對稱。陰囊象皮腫皮膚粗厚，或有疣狀增生，有沉重感，陰莖常內縮。陰莖象皮腫的陰莖呈粗長的屈曲畸形。
A.2.2.2 乳糜尿：爲慢性班氏絲蟲病的常見臨牀表現，特點是不定期間歇性發作的乳糜尿或乳糜血尿。發作前常可出現尿渾濁及腰、盆腔、腹股溝部痠痛等先兆症狀，隨後出現乳糜尿或乳糜血尿。如尿內有凝塊，可導致排尿困難和疼痛。發作誘因一般是攝入較多脂肪和勞累等。乳糜尿靜置後不久可分爲3層，上層爲脂肪，呈膠狀凝塊浮於液體之上；中層爲白色較清之液體，常混懸有小凝塊；下層爲沉澱物，含紅、白細胞等。乳糜尿內加入乙醚後脂肪被溶解，尿液變澄清。
A.2.2.3 鞘膜積液：爲班氏絲蟲病常見體徵。鞘膜積液多爲一側，少數爲雙側。輕者無明顯症狀，發展較緩慢。重者積液較多，有下墜感，患側陰囊體積增大，呈卵圓形，不對稱，皮膚緊張，表面光滑，皺褶消失，陰莖內縮。檢查無壓痛，囊樣，同側睾丸不易觸及，透光試驗陽性。
13 附錄B（規範性附錄）病原學檢測
13.1 B.1 血液檢查微絲蚴
13.1.1 B.1.1 厚血膜法
B.1.1.1 血片製作：於晚9時至翌晨2時，以皮膚消毒劑消毒耳垂（或指端）待幹，用一次性採血針快速深刺，取血6大滴，約等於120μl，塗於2張玻片，製成邊緣整齊、厚薄均勻的橢網形厚血膜（約長3cm、寬1.5cm），平放於有蓋的玻片盒內。
B.1.1.2 血片染色：將經自然乾燥的血片放入清水中溶血5min～10min，至血膜呈乳白色，取出晾乾，固定，染色。大規模普查可用硼砂美藍染色，鑑定蟲種或保存標本宜用吉氏液或蘇術素染色。
B.1.1.2.1 硼砂美藍染色法：取美藍2g，硼砂3g，置研鉢內，邊研邊加水，待溶解後沖洗人瓶中，加蒸餾水100ml配成原液，過濾後放置備用。染色時取原液5ml加清水配成5%稀釋液，染3min～5min，使血膜呈天藍色，然後用清水輕輕沖洗。本法染色前可不必先溶血、固定。
B.1.1.2.2 吉氏染色法：染液由吉氏粉0.5g，中性甘油25ml及甲醇25ml配成。先置染粉於研鉢內，加少量甘油充分研磨，邊研邊加，至甘油加完爲止，然後移入帶玻璃塞的100ml玻塞瓶內，用甲醇小量多次洗滌甘油染液移入瓶內，蓋緊瓶蓋，充分搖勻，置於55℃～60℃溫箱內24h或室溫下3d～5d，即爲原液，放置愈久染色效果愈佳，臨用時稀釋。將溶血後已乾的血片用甲醇固定約1min，然後滴加10%染液（原液加清水稀釋配成）染色45min，用蒸餾水輕輕沖洗。
B.1.1.2.3 德氏蘇木素染色法；染液由A液即銨明礬飽和液（銨明礬20g、蒸餾水100ml）；B液（蘇木素結晶1g加純酒精10ml）；C液（甘油25ml加甲醇25ml）配成．，將B液逐滴加入A液中，倒入一不蓋緊的容器內，置於空氣流通處，經2周至1個月使其充分氧化，過濾後加入C液，密封備用。血片溶血、固定步驟同前。用上述染液染色10min～20min，用0.05%～0.1%稀鹽酸脫色片刻，流水沖洗至血膜呈藍色。
B.1.1.3 血片鏡檢：將染色的血片在低倍顯微鏡下順序逐個視野檢查微絲蚴並計數，根據微絲蚴的大小、體態、折光性、有無鞘膜、表皮是否光滑及內部結構等特徵，予以確定。在高倍鏡下觀察微絲蚴的體核及頭端空隙、神經環、排泄細胞、排泄孔、肛孔、尾核等結構，以鑑別班氏和馬來微絲蚴。必要時用油鏡作進一步鑑別。
特徵 | 班氏微絲蚴 | 馬來微絲蚴 |
長度（μm） | 244～296（平均260） | 177～230（平均220） |
寬度（μm） | 5.3～7.0 | 5.0～6.0 |
體態 | 柔和，彎曲自然，無小彎 | 僵直，大彎上有小彎 |
頭端空隙（長寬比） | 較短（1：1） | 較長（2：1） |
體核 | 圓形，排列整齊，各核分開，清晰呵數 | 卵圓形，大小不等，排列緊密，常相互重疊，不易分清 |
尾核 | 無 | 2個 |
13.1.2 B.1.2 微絲蚴濃集法
B.1.2.1 改良蒸餾水法：取靜脈血1ml（取血時間同B.1.1），置於盛有0.4ml 3.8%（枸櫞酸鈉的離心管內，混勻後加蒸餾水8ml～10ml，反覆搖勻，待紅細胞溶解後經3000轉／min轉離心3min～5min，棄上液，加0.05mol/L氫氧化鈉8ml～10ml，按住管口，用力振盪數次，放置5min～10min，使纖維蛋白凝塊迅速溶解，再離心，吸除上清液，將沉渣塗片，待幹、染色、鏡檢。
B.1.2.2 微孔膜過濾法：將已編號的直徑25mm、孔徑5μm的微孔薄膜經蒸餾水漂洗後裝入過濾器內，濾膜下墊一張同樣大小經生理鹽水潤溼的濾紙。用注射器取靜脈血1ml（取血時問同B.1.1），加5%枸櫞酸鈉0.1ml抗凝，吸入10%聚氧乙烯脂肪醇硫酸鈉[或可用2%吐溫-80、0.1%碳酸氫鈉或10%聚氧乙烯脂肪醇硫酸鈉（ES）]溶液9ml，混勻後，去針頭，直接插入過濾器，緩慢推動注射器加壓，使已溶血的血液通過濾膜，以10ml生理鹽水洗滌濾膜3次。開啓過濾器，取出薄膜，自然晾乾後，置加熱的蘇木素染液中染色5min，水洗，待幹，鏡檢。
13.2 B.2 淋巴液、鞘膜積液、乳糜尿內微絲蚴的檢查
B.2.1 淋巴液、鞘膜積液（或其他抽出液）：直接塗片或用生理鹽水稀釋10倍離心後檢查沉渣。液體蛋白含量高而呈膠狀易凝者，加抗凝劑後檢查。
B.2.2 乳糜尿（或乳糜積液）：取乳糜尿4ml於試管中，加乙醚2ml，混合振搖，使乳糜中脂肪充分溶解，棄去上層脂肪，加水稀釋10倍後離心檢查。
13.3 B.3 活體組織檢查
B.3.1 檢查淋巴管、淋巴結內成蟲：將手術取出的結節，用大頭針固定於木板或軟木板上，分離結節周圍組織，仔細將病變的淋巴管壁切開，分離內容物，取出乾酪樣膿樣物檢查。如於結節出現2周以後切除、解剖，則管內膿樣物可能已纖維化。膿樣物內含大量巨噬細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞及夏-雷晶體。將乾酪樣物或纖維組織移至載玻片上，加數滴生理鹽水，然後用解剖針將外層組織分離，即可見被包圍的成蟲。時間較久者發生粘連，蟲體成碎段，不易將蟲體與組織分離，則可用一針將包圍的組織固定，另一針將蟲體沿其長軸向一端輕移，或將組織移至盛有生理鹽水的培養皿巾，使蟲體半浮，較易分離。但如結節形成較久，則不易取得完整的成蟲。成蟲或蟲段可保存於甘油酒精（70%酒精95ml，甘油5ml）小，供形態觀察及鑑定。
B.3.2 病理組織學檢查：切下可疑的淋巴結、淋巴管結節或其他組織，用10%中性甲醛同定1d～2d，移至70%酒精中作病理切片。在切片中除可發現絲蟲成蟲外，亦可見到嗜酸性粒細胞、淋巴細胞、肉芽腫、假結核、纖維組織增生、淋巴管周圍炎、管腔內肉芽組織增生形成栓塞或息肉狀阻塞管腔等病理變化。在切片中所見成蟲，如結構清楚，雌蟲體內的微絲蚴體核清晰，所在淋巴管壁有少量漿細胞、淋巴細胞和嗜酸性粒細胞浸潤，而無纖維素沉積或肉芽腫形成者，則可能爲活蟲。如蟲體周圍有較多的嗜酸性粒細胞和散在的組織細胞，蟲體被炎細胞包繞形成肉芽腫，纖維化後形成纖維化結節，或結節內蟲體已鈣化，則均爲死蟲。如出現中性粒細胞浸潤、滲出，內膜內皮細胞腫大、增生，則爲繼發性細菌感染。
14 附錄C（規範性附錄）血清學檢測
14.1 C.1 快速免疫色譜試驗（ICT）檢測班氏絲蟲抗原
C.1.1 試劑盒內容物（置4℃可保存6個月）：含測試卡、試劑A和100μl刻度毛細管。
C.1.2 血樣：全血100μl。
C.1.3 操作步驟
C.1.3.1 打開測試卡，移去並丟棄粘膠襯裏，確保卡的右手邊緣粘膠是暴露的。
C.1.3.2 利用毛細管的虹吸作用，從耳垂或手指取血，使毛細管內血量吸至100μl刻度線。
C.1.3.3 將100μl全血從毛細管加到測試卡粉紅色和白色墊的頂部。注意每一滴血完全吸收後再加第二滴。如毛細管內的血滴出不暢，可將管尖輕按墊子。
C.1.3.4 等墊子的粉紅色部分完全浸透血清（約需30s～1min）後關閉測試卡。如在1min～2min墊子的粉紅色部分仍未能浸透血清，應加1滴試劑A。爲保證測試效果，應用力壓緊測試卡視窗右邊區域，並開始計時。
C.1.4 結果判斷標準
關閉測試卡2min後，通過測試卡視窗讀結果。若在視窗內見到2條線（對照線和測試線），則結果爲陽性；如只有對照線顯示，則結果爲陰性。注意如是弱陽性血樣有充分的時間顯示，應從關閉測試卡15min後再做記錄，以確定陰性結果。如果對照線不顯示，則測試無效，應重新進行測試。
14.2 C.2 ELISA檢測絲蟲特異IgG4抗體試驗
C.2.1 試劑盒內容物（置4℃可保存6個月）：含絲蟲抗原包被板、抗人IgG4酶結合物、洗滌劑乾粉、底物稀釋液、底物乾粉、反應終止液、陰性對照、陽性對照。
C.2.2 血樣（血清或濾紙血）
C.2.2.1 血清：採集受檢者的靜脈血或末梢血，離心後收集血清。在低溫下運送，4℃保存，-20℃可長期保存。
C.2.2.2 濾紙血：以潔淨濾紙沾取自然流出的一滴耳垂或手指血（約20μl），血斑直徑應在1.1cm～1.2cm，厚薄均勻。自然乾燥後密封置4℃保存（可保存約6個月）。
C.2.3 操作步驟
C.2.3.1 將每袋洗滌劑乾粉用500ml蒸餾水溶解作反應板洗滌液和樣品稀釋液用。血清樣本按1:40稀釋，濾紙血樣本按直徑1.1cm圓片加400μl樣本稀釋液，37℃浸泡2h（或4℃過夜）稀釋處理。
C.2.3.2 取已稀釋的樣本100μl加入反應板孔內，同時設陰性、陽性對照（陰、陽性對照已稀釋，直接加入100μl）及空白對照（100μl樣本稀釋液）各1孔，37℃反應90min後甩去孔內液體，用洗滌液加滿各孔，靜置30s後甩去，共洗5次，最後一次拍幹。
C.2.3.3 除空白對照孔外每孔加抗人IgG4酶結合物2滴，37℃反應90min後甩下孔內液體。同上洗滌。
C.2.3.4 將底物乾粉完全溶解於底物稀釋液中（底物溶解後4℃避光可保存l周），各孔加入底物溶液2滴，37℃30min後加1滴終止液終止反應，混勻，觀察結果。
C.2.4 結果判斷標準
C.2.4.1 肉眼觀察：當陰性對照孔無色或顯微黃色，陽性對照孔呈明顯黃色時，試驗有效。待檢樣品孔顏色呈明顯深於陰性對照的黃色即判爲陽性。
C.2.4.2 儀器檢測：應用酶標儀以空白對照孔調零，在波長405nm處讀取各孔OD值。以樣本OD≥陰性對照OD值的2.1倍爲陽性，若陰性對照OD值不足0.07，按0.07計算。
