3 概述
血中嗜酸性粒細胞也來源於多能幹細胞,在細胞的前體(precursors)階段已能與其他髓系細胞區別,體外培養可分離出嗜酸性粒細胞祖細胞(eosinophil committed cell)。血中嗜酸性粒細胞量在晝夜有明顯變化,清晨較低,夜間較高。其週期變化與血中腎上腺皮質的糖皮質激素呈負相關,糖皮質激素升高,嗜酸性粒細胞減少;反之,嗜酸性粒細胞則升高。嗜酸性粒細胞的胞質內含有嗜酸性顆粒,早期嗜酸性粒細胞所含的顆粒較大,後期細胞所含的顆粒較小。
5 嗜酸性粒細胞計數的醫學檢查
5.1 檢查名稱
5.2 分類
5.3 取材
5.4 嗜酸性粒細胞計數的測定原理
用嗜酸性粒細胞稀釋液將血液稀釋一定倍數,同時破壞紅細胞和大部分其他白細胞,並將嗜酸性粒細胞着色,然後滴入細胞計數盤中,計一定範圍內嗜酸性粒細胞數後計算每升血液中嗜酸性粒細胞數。嗜酸性粒細胞稀釋液種類繁多,但其作用大同小異。主要是保護嗜酸性粒細胞並破壞其他細胞的物質。且着染嗜酸性粒細胞的物質(如溴紫、伊紅、石楠紅等)。
5.5 試劑
下述瑞氏-姬姆薩複合試劑或快速染液可任選一種。
(1)瑞氏-姬姆薩複合染色液:甲液:取瑞氏染粉1g,姬姆薩染粉0.3g,置乾燥清潔研鉢中,另備甲醇(不含水或丙酮)500ml分數次加少量甲醇研磨,分次收集於棕色玻璃瓶中,每天早晚各搖勻3min,經1周後即可應用。乙液(磷酸緩衝液)(pH值6.8~7.0):磷酸二氫鉀(無水)0.3g,磷酸氫二鈉(無水)0.2g,加適量水溶解,校正pH值,加水至1L,可加入0.01%TritonX-100改善染色性。
(2)快速染液甲液:取磷酸二氫鉀6.64g,磷酸氫二鈉2.56g,水溶性伊紅4g(或伊紅B2.5g)加水1L,酚40ml。乙液:亞甲藍4g,高錳酸鉀2.4g,水1L,煮沸,冷後備用。
5.6 操作方法
(1)採血1小滴於載玻片一端,用一推片以35°~45°傾斜推出四周留有適量空隙,可分清頭、體、尾的薄血片。血膜長度不少於2.5cm,末梢至玻片另一端尚餘空隙約1cm。血膜幹後染色。
(2)瑞氏姬姆薩複合染色法:平置血片於染色架上,加染色液3~5滴,立即蓋滿血膜,約30s後加緩衝液5~10滴,輕輕搖動玻片或輕輕吹氣使染液與緩衝液混和,5~10min後用水衝去染液,待幹後鏡檢。
(3)快速法:將快速染液甲液、乙液分別置於適當大小染色缸中,將血片先浸入甲液30s,水洗,再浸入乙液30s,水洗,待幹後鏡檢。
(4)鏡檢:選擇血膜體尾交界處,紅細胞已基本不相重疊之處用油鏡檢查,檢查應上下左右有一定方向,並顧及血膜長徑兩側邊緣,否則影響各類細胞的檢出率。計數100~200個白細胞,按其形態分類,並求出百分率。
5.7 正常值
血細胞自動計數儀:(50~300)×106/L (50~300/mm3)。
5.8 化驗結果臨牀意義
(1)嗜酸性粒細胞增多:
①過敏性疾患:支氣管哮喘、蕁麻疹、結節性多動脈炎、藥物過敏、血清病等。
②皮膚病:天皰瘡、皰疹性皮炎、癢疹、多形性滲出性紅斑、溼疹等。
④感染症:猩紅熱、麻疹潛伏期、呂弗琉(Löffler)綜合徵、感染性疾病恢復期等。
⑤血液病:嗜酸性粒細胞性白血病、慢性粒細胞性白血病、霍奇金病、惡性貧血、家族性嗜酸粒細胞增多症、熱帶性及非熱帶性嗜酸細胞增多症、骨髓纖維化、器官移植排斥反應等。
⑥其他:放射線照射後、卵巢腫瘤、肉樣瘤病、腎上腺皮質功能減退症等。
(2)嗜酸性粒細胞減少:
③應激狀態。
5.9 附註
白細胞分類受技術因素和細胞分佈因素等原因而有較大變異,故分類計數的離散度較大,且分類中佔大比例的如中性粒細胞及淋巴細胞變異呈正態分佈,佔小比例的如嗜酸粒細胞、嗜鹼粒細胞及單核細胞呈普哇松分佈。根據Rümke等研究,白細胞分類計數的95%及99%可信限範圍,可參見下表(表1)查得。例如某血片作200個白細胞分類,其中粒細胞爲60%(p),其他細胞爲40%(q),則出現p可能性的標準誤(SEp)爲,n爲計數的細胞數,查表Low95%及High95%行與p60,q40列,相交處得53及67,即本例分類95%可信限最低爲53%,最高爲67%,同理99%可信限爲51%~69%。也即對同份血片或同一病人的另一張血片再作白細胞分類計數時,有95%的可能性,粒細胞的分類計數範圍在53%~67%,99%的可能性範圍爲51%~69%。超出此範圍的即認爲分類計數誤差過大,不符質量要求,應予重視。
5.10 相關疾病
支氣管哮喘、蕁麻疹、麻疹、結節性多動脈炎、天皰瘡、溼疹、蛔蟲病、鉤蟲病、囊蟲病、猩紅熱、霍奇金病、嗜酸粒細胞增多症、卵巢腫瘤、腎上腺皮質功能減退症、傷寒、副傷寒