質粒DNA的提取與純化
1質粒DNA的提取 質粒DNA是細菌細胞中小的共價閉合環狀雙鏈DNA。由於基因工程中使用的載體主要是質粒,因此,質粒DNA的提取和純化是進行基因工程的重要前提。提取質粒DNA的方法很多,下面介紹幾種有代表性的程序。 1)...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術大腸埃希菌耐藥性質粒的提取及鑑定
...希菌對抗生素的敏感性,同時用鹼裂解法對耐藥菌株進行質粒的抽提,將得到的質粒轉化至受體菌JM109進行質粒耐藥性的鑑定。結果40株大腸埃希菌對頭孢菌素等9種抗生素呈現出不同程度的耐藥現象。對氨苄西林和青黴素的耐藥...
醫源資料庫;在線期刊;中華醫學實踐雜誌;2008年第7卷第2期肺炎克雷伯桿菌產β-內酰胺酶耐藥性質粒的提取及鑑定
【摘要】目的探討耐藥性質粒在肺炎克雷伯桿菌中的耐藥機制。方法採用瓊脂稀釋法測定臨牀分離的31株肺炎克雷伯桿菌對阿奇黴素、氨苄西林和頭孢菌素類抗生素的耐藥性,採用質粒DNA小量製備的鹼裂解法對耐藥菌株進行質粒...
醫源資料庫;在線期刊;中華醫學實踐雜誌;2007年第6卷第8期DNA的提取和純化
...(有含有行當抗生素的液體培養基中生長),然後從中純化質粒,質粒的提純幾乎總是如此。現在使用的許多質粒載體(如pUC系列)都能複製到很高的拷貝數,惟致只要將培養物放在標準LB培養基中生長到對數晚期,就可以大量提...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術核酸分離純化實驗技術指南
...裂解液的裂解能力,裂解將不完全,從而導致RNA得率低。質粒DNA提取常見問題分析Q:未提出質粒或質粒得率較低,如何解決?A:1.大腸桿菌老化:請塗布平板培養後,重新挑選新菌落進行液體培養。2.質粒拷貝數低:由於使用低拷...
藥品天地;專業藥學;實驗技術;色譜技術;色譜入門核酸分離純化實驗技術指南
...裂解液的裂解能力,裂解將不完全,從而導致RNA得率低。質粒DNA提取常見問題分析Q:未提出質粒或質粒得率較低,如何解決?A:1.大腸桿菌老化:請塗布平板培養後,重新挑選新菌落進行液體培養。2.質粒拷貝數低:由於使用低拷...
藥品天地;專業藥學;實驗技術;色譜技術;色譜分析實例質粒DNA的鹼裂解法提取與純化
細菌質粒是一類雙鏈、閉環的DNA,大小範圍從1kb至200kb以上不等。各種質粒都是存在於細胞質中、獨立於細胞染色體之外的自主複製的遺傳成份,通常情況下可持續穩定地處於染色體外的遊離狀態,但在一定條件下也會可逆地整...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術一個植物乳桿菌隱蔽質粒的測序和註釋
...植物乳桿菌(LactobacillusplantarumCICC6002)中發現了1個隱蔽質粒(pLP2111),並將其克隆到pUC18質粒上進行測序。序列分析表明pLP2111大小爲2111bp;僅有1個ORF,編碼1個37.0kDa的複製蛋白;有1個17bp的重複序列重複了13次。BLAST結果顯示pLp2...
醫源資料庫;在線期刊;成都醫學院學報;2009年第4卷第1期重組質粒的提取
質粒提取過程參照E.Z.N.APlasmidExtractionKit進行。 (1)用無菌牙籤挑取平板上白色單菌落(5~10個)分別接種至3-5mlLB培養液(Amp+)中,200rpm培養14~16小時; (2)室溫下,10,000g離心1分鐘收菌; (3)加入溶液I250μl,渦旋重...
醫藥經濟;生物技術;實驗技術;生化與分子技術質粒消除現象的研究現狀與意義
...。近年來許多科學家和臨牀醫生都在尋找有效的消除耐藥質粒的方法,試圖恢復細菌對藥物的敏感性,並取得了一定的進展。本文對近年藥物消除細菌耐藥性質粒(R質粒)的研究進行了綜述。 【關鍵詞】消除;耐藥性質粒 ...
醫源資料庫;在線期刊;中華中西醫雜誌;2005年第6卷第22期