人IL-12的克隆、表達及生物活性的鑑定
...力顯著超過12.5ng/ml參照IL-12的效應。在與抗IL-12的中和性單克隆抗體(MAB219)作用後,其活性大大減弱。 2.4 IL-12的免疫學鑑定 對經免疫濃縮的轉導細胞上清及未經濃縮的細胞裂解進行Westernblot分析,結果在70kD處可見有特異性...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學梅毒螺旋體Tpp17基因的擴增、克隆及表達
...動性結核病病人血清和5例健康人血清均陰性,初步應用未見假陽性,特異性和敏感性高,可能是一種診斷梅毒的實用技術。 圖1 SDS-PAGE分析Tpp17基因在E.coliK12-TB1的表達 M:標準相對分子質量;1:pMAL-C2質粒;2~4:IPTG(1m...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學反義hTERT體外誘導肺癌細胞凋亡的研究
...隆均可見一條大小約340bp的特異性條帶,而空白對照組則未見,說明GLC-82人肺腺癌細胞已被成功地轉入了正、反義hTERT外源重組體。 圖1G418抗性克隆外源基因片段的PCR擴增結果M:100bpladderMarker;1:GLC-82;2:GLC-82-s;3:GLC-82-as(略) ...
合作平臺;在線期刊;中華醫學實踐雜誌;2005年第4卷第7期;論著小鼠次級淋巴組織趨化因子基因的克隆及真核表達載體的構建ˇ
...菌,用mSLC特異引物做菌落的質粒PCR擴增出400bp左右的特異條帶(圖3)。用NheI/NotI雙酶切,可切得約5.4kb和2kb的兩條帶(圖4),其中2kb條帶爲mSLC-GPI-Fc片斷;用NheI/EcoRV雙酶切可獲得約7kb和400bp的兩條帶(圖5),其中分子量在400bp位...
合作平臺;在線期刊;中華醫學實踐雜誌;2004年第3卷第11期;論著嗜酸乳桿菌推定的β半乳糖苷酶基因在大腸桿菌中的功能性表達
...℃延伸10min.凝膠電泳檢測PCR結果,PCR純化試劑盒回收目的條帶。1.3嗜酸乳桿菌β半乳糖苷酶表達載體構建分別用對應的內切酶對PCR產物和載體進行雙酶切,膠回收後用T4DNA連接酶連接,再將連接產物電轉化入宿主菌株。共構...
醫源資料庫;在線期刊;成都醫學院學報;2009年第4卷第2期人內皮抑制素在酵母細胞中的表達及其促成纖維細胞有絲分裂活性
...蛋白帶,這與預期的蛋白質分子量基本一致,而未誘導組未見有明顯的重組蛋白的表達。 2.5 表達的重組蛋白的Western印跡分析 利用抗GST的抗體與辣根過氧化物酶標記的二抗對重組蛋白進行了Western印跡分析。結果(圖3)顯示...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學膠體金免疫層析法快速檢測腹瀉性貝毒軟海綿酸的研究
...。本文用膠體金標記利用細胞融合技術製備的抗軟海綿酸單克隆抗體,使用卵清蛋白合成高偶聯比的包被抗原,以硝酸纖維素膜爲載體,利用免疫層析技術原理,建立了快速檢測軟海綿酸的免疫層析試紙條方法。方法檢出限12ng/mL(0.96...
藥品天地;專業藥學;實驗技術;色譜技術;色譜論文自身抗原La融合蛋白在大腸桿菌中的表達及免疫學鑑定
...糖凝膠電泳觀察酶切產物和PCR產物,PGEX-2T,重組質粒的條帶。 1.4 重組質粒在大腸肝菌的表達與鑑定 挑取上述經鑑定後的重組克隆於LG/Amp培養液37℃振搖過夜,次日1∶100稀釋轉種於新的LB/Amp培養液中,37℃振搖培養約3h(OD...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學剔除護骨素基因的小鼠胚胎幹細胞雜合子模型的建立
...cles:72℃10min。發生同源重組的ES克隆DNA應特異擴增出5.0kb條帶。下游同源臂方向設計引物5-ggaaaaactcaacccccatactca-3位於下游同源臂外側基因組上;5-gctaccggtggatgtggaat-3位於neo基因3端,反應條件爲:95℃,5min;94℃50s;61℃50s;72...
醫源資料庫;在線期刊;中華現代內科學雜誌;2007年第4卷第1期豬卵透明帶-3α基因在大腸桿菌中的融合表達和鑑定
...通過遺傳工程獲得ZP3α融合蛋白,以便用表達產物製備ZP3α單克隆抗體。方法 根據重新測序的豬ZP3αcDNA5‘端非編碼鹼基數,pWR450表達質粒家族的pWR450-2被選用來表達β-半乳糖苷酶(LacZ)/ZP3α融合蛋白。帶5‘端非編碼區和信號順序的...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學