抗人C1q雜交瘤細胞中一未知DNA片段的克隆與分析
...計的通用引物順序,在5′和3′端分別引入SalI、EcoRI酶切位點,以利於擴增的DNA片段定向克隆進測序載體。 1.2.4 RT-PCR擴增:首先依反轉錄cDNA第一鏈合成Kit合成cDNA第一鏈,再設定循環參數進行PCR反應:在100μl的反應體系中加...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學抗-EGFR療法中的獲得性抗藥性
...自最初診斷一直保存的原發腫瘤的活檢樣本和來自新轉移位點的活檢。然而單一的活檢是不充分的。原發腫瘤和它們的轉移竈是通過包含癌細胞、基質和血管等支持結構在內的不同組織的混合物連接。此外,在腎細胞癌中的研究...
藥品天地;專業藥學;藥學研究國內外標記免疫分析技術研究現狀
...物理吸附法,所包被蛋白質的量小,均一性差,僅適合雙位點夾心法。1990年Causse等[2]提出以順丁烯二酸酐-苯乙烯共聚體處理聚苯乙烯管進行活化,以共價鍵結合包被,提高了包被的牢固性、均一性和蛋白質的量。但因工藝流...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學微小隱孢子蟲重組BCG-CP15/60-23疫苗的構建及鑑定
...5'-GCGGTCGACATTAGGCATCAGCTGGCTTGTC-3'。P1的5'端引入EcoRⅠ酶切位點,P2的5'端引入SalⅠ酶切位點,引物由上海生工生物工程技術服務有限公司合成。 1.2.3PCR擴增CP15/60-23基因在25μl的反應體系中,加引物P1、P2各1μl,10×PCRbuffer2....
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2008年第8卷第6期抗胃癌鼠單抗3H11Fab段載體的構建、表達及抗體活性檢測
...基因。但通用引物以及爲便於克隆所引入的限制性內切酶位點,可在V區氨基端造成氨基酸殘基的改變。這些變化是否會影響所構建抗體的活性,有不同的報道〔1,2〕。本文報道在構建抗胃癌鼠單抗3H11Fab的過程中,輕鏈PCR引物...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學CTX-M-3型超廣譜β-內酰胺酶的序列分析與原核表達
...遊引物和下游引物分別引入限制性內切酶BamHI和EcoRI識別位點。由上海Invitrogen英俊生物公司合成。 上游:.5’-GCGAATTCATGGTTAAAAAATCACTGCGCC-3’ 下游:5’-GCGGATCCTTACAAACCGTCG-3’ 1.4PCR以加熱裂解法提取細菌總DNA,PCR...
醫源資料庫;在線期刊;中國熱帶醫學雜誌;2007年第7卷第12期第五節 免疫透行射比濁法
...別是磷脂)有高度親和力,與脂質結合後有時會掩蓋抗原位點或構象改變,可以部分或完全喪失對抗血清的特異反應。爲此,載脂蛋白檢測過程中有必要先暴露抗原位點,所用試劑有表面活性劑,尿素,鹽酸胍和吐溫等解離蛋白...
醫源資料庫;醫源圖書館;教材類;動脈粥樣硬化以Bacmid-桿狀病毒-昆蟲細胞系統表達人FGF-9①
...製備 將pYEX4T-1載體上人FGF-9cDNA片段以EcoRⅠ和SalⅠ雙酶切位點定向插入pFastBac供體質粒,在DH5α宿主菌內擴增,鑑定出陽性克隆後,將重組pFastBac供體質粒轉入DH10Bac細胞,在含有卡那黴素、慶大黴素、四環素及IPTG的培養板上挑選...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學我國登革2型病毒43株PrM-E基因的DNA免疫原性研究
...斜體爲外加鹼基。其中U372的5′端設計有NheⅠ和XhoⅠ酶切位點,及一個含ATG起始密碼子的Kozak序列:CCACCATGG。L2389含有外加的XhoⅠ酶切位點和TTA終止密碼子。L1536和U1532中的HindⅢ酶切位點爲PrM-E基因中所含有的序列。 從我國病...
合作平臺;醫學論文;臨牀醫學與專科論文;檢驗醫學小鼠次級淋巴組織趨化因子基因的克隆及真核表達載體的構建ˇ
...引物,上游引物爲:5’-CTCAGCTAGCACCATGGCTCAGATGATGAC3’(含NheI位點);下游引物爲:5’-GTTCGATATCTCCTCTTGAGGGCTGTGTC3’(含EcoRV位點)。用TrizolRNA提取試劑盒提取C57BL/6小鼠脾臟組織淋巴細胞中的總RNA,再用SuperScriptIII逆轉錄試劑盒將上述總RNA...
合作平臺;在線期刊;中華醫學實踐雜誌;2004年第3卷第11期;論著