4 尿C肽的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 化驗取材
4.4 尿C肽的測定原理
放射性標記物125I-CP和標本（或標準品）中的C肽與有限的C肽抗體競爭性結合，達到平衡後，加入分離劑，測定沉澱物中放射活性，與標本中C肽含量成負相關。
4.5 試劑
（1）0標準品：含硫柳汞的BSA硼酸鹽緩衝液（凍幹）。用20ml蒸餾水或去離子水溶解，靜置15～20min直至完全溶解。用前充分混勻，溶解後的試劑放－15℃以下保存。
（2）人胰島素C-C-肽標準品：人胰島素C-C-肽標準品溶於含穩定劑的BSA-硼酸鹽緩衝液中（凍幹）濃度範圍0.6～20ng/ml，用方法B，還需一低濃度標準品0.15ng/ml，每瓶標準品用1ml蒸餾水或去離子水溶解，靜置15～20min直至完全溶解，用前充分混勻，溶解後的試劑放－15℃以下保存。
（3）兔抗胰島素C-C-肽血清：兔抗胰島素C-C-肽血清溶於含硫柳汞的BSA-硼酸鹽緩衝液中（凍幹），已加綠色染料，用14ml蒸餾水或去離子水溶解，靜置室溫15～20min直至完全溶解，用前充分混勻。溶解後的試劑放－15℃以下保存。
（4）125I胰島素C-C-肽：125I標記的人胰島素C-C-肽溶於含硫柳汞的BSA-硼酸鹽-EDTA緩衝液中（凍幹）。用14ml蒸餾水或去離子水溶解，靜置15～20min，直至完全溶解，用前充分混勻，溶解後的試劑放－15℃以下保存。
（5）羊抗兔抗體與沉澱混合液（GAR-PPT）：羊抗兔抗血清與PEG混合溶於含防腐劑的BSA-硼酸鹽緩衝液中（凍幹）。用35ml蒸餾水或去離子水溶解。充分混勻直至懸濁液混合均一，然後置室溫至少30min並不斷混勻，溶解後的試劑放－15℃以下保存。
（6）質控血清（質控-Ⅰ、質控-Ⅱ）：含NaN3和其它穩定劑（凍幹），用1.0ml蒸餾水或去離子水溶解、混勻，置室溫15～20min，直至完全溶解，用前充分混勻，將質控血清當作未知標本進行測定，每批的具體數值可從各試劑的質控圖上找到。溶解後的試劑放－15℃以下保存。
（7）PEG（25%）。
2～8℃以下保存。
4.6 操作方法
（1）方法1：
①溶解凍乾的試劑或將凍存的試劑徹底復融，操作溫度不得高於25℃，用前輕輕混勻。
②將試管編號，均做雙管。
③加入試劑：
A.總計數管：放置一旁至步驟④。
C.0標準品：100μl 0標準品＋200μl兔抗胰島素C-C-肽血清。
D.胰島素C-C-肽標準品（A-E）：100μl標準品＋200μl兔抗胰島素C-C-肽血清。
E.質控和待測標本：100μl血清或尿標本＋200μl兔抗胰島素C-C-肽血清。
④每管加200μl125I胰島素C-C-肽。
⑤輕輕混勻，試管中不能產生氣泡，2～8℃孵育16～24h。
⑥沉澱劑用前充分混勻，除總計數管外每管加500μl沉澱劑。
⑦輕輕混勻，試管中不得有氣泡，20～25℃孵育15～20min。
⑧在20～25℃以760×g離心20min。
⑩用γ計數器計數沉澱和總計數管。
（2）方法2：
①溶解凍乾的試劑或將凍存的試劑徹底復融。操作溫度不得高於25℃，用前輕輕混勻。
②將試管編號，均做雙管。
③加入試劑。
A.總計數管：放置一旁至步驟⑤。
C.0標準品：100μl 0標準品＋200μl兔抗胰島素C-C-肽血清。
D.胰島素C-C-肽標準品（A-E）：100μl標準品＋200μl兔抗胰島素C-C-肽血清。
E.質控和待測標本：100μl血清或尿液標本＋200μl兔抗胰島素C-C-肽血清。
④2～8℃孵育16～24h。
⑤每管加200μl125I胰島素C-C-肽。
⑥輕輕混勻，不得有氣泡，2～8℃孵育16～24h。
⑦沉澱劑用前充分混勻，除總計數管外，每管加500ml。
⑧輕輕混勻，不得有氣泡，20～25℃孵育15～25min。
⑨在20～25℃以760×g離心20min。
⑪用γ計數器計數沉澱和總計數管。
4.7 正常值
45～117μg/24h。
4.8 化驗結果臨牀意義
（2）降低：1型糖尿病。
4.9 附註
留尿送檢時，並需註明是否用胰島素治療。