3 概述
內皮素是由21個氨基酸組成的生物活性多肽。內皮素具有強烈的收縮冠狀動脈、腎小動脈;刺激心鈉素的釋放,提高全身血壓;抑制腎素釋放等作用。內皮素是一種多功能生理調節激素,參與多種疾病(如休克、腦血管病)的發生發展。
4 內皮素的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 內皮素的測定原理
RIA法:內皮素(endothelin,ET)是由血管內皮細胞釋放的21個氨基酸殘基所組成活性多肽。它是迄今所知收縮血管作用最強的物質。由於在血漿中濃度很低,樣品要經柱層析純化,125I-ET要求必須高純度和高比放射活性,以此建立超靈敏的放射免疫方法。樣品中微量的ET首先和限量抗體結合,然後再加入125I標記ET和抗體剩餘部分結合,即非平衡法來完成樣品中極微量ET的測定。
4.4 試劑
(1)緩衝液:取0.1mol/L pH7.4PB 1000ml,加NaCl 2.5g,BSA 1g,NaN30.5g,
Triton X-100 1ml。
(2)標準ET1液:取每安瓿含有10ng ET1標準品,用緩衝液溶解,稀釋成100μl中含有0.25,1.0,10,100,1000pg。臨用前配製。
(3)125I-ET1:取標記物用緩衝液稀釋至100μl中約6000~8000cpm。
(4)抗血清:用緩衝液稀釋至100μl結合125I-ET-1 100μl的30%~40%。臨用前配製。
(5)PR分離劑:取140g/L PEG20ml,加入蒸餾水70ml,羊抗兔IgG血清3ml,正常兔血清0.5ml,纖維素粉0.5g,加蒸餾水至100ml,放4℃ 12h後應用。
4.5 操作方法
(1)取10mm×75mm塑料管,按表1加入樣品和試劑。樣品和標準均作復管。
(2)加PR分離劑後即刻混合,放37℃ 30min。離心3500r/min 20min。減壓吸去上清液。在自動γ免疫計數器上測量。
(3)從放免數據處理程序可直接給出樣品管濃度,或以B/B0%爲縱座標的標準曲線上查出樣品管濃度。
(4)樣品管濃度(pg)×4(樣品體積)÷2(血漿量)即得血漿ET1pg/ml(ng/L)。
4.6 正常值
升高:見於原發性高血壓、急性心肌梗死、心絞痛發作期、感染性休克、腎臟疾病、尿毒症、腦出血、腦梗死、原發性肝癌、肝硬化、十二指腸潰瘍等。
4.7 化驗結果臨牀意義
4.8 附註
在高血壓、心肌梗死和腎病中,內皮素上升的幅度與病情密切相關,病情越嚴重內皮素升高的幅度越大,經過治療病情好轉後內皮素逐漸降低。