梅毒螺旋體制動試驗

化驗及醫學檢查 血清學檢查

心氣虛,則脈細;肺氣虛,則皮寒;肝氣虛,則氣少;腎氣虛,則泄利前後;脾氣虛,則飲食不入。
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1 拼音

méi dú luó xuán tǐ zhì dòng shì yàn

2 英文參考

treponema pallidum immobilizing test

3 概述

梅毒螺旋體(treponema pallidum,TP)屬密螺旋體屬,是人類梅毒病原體梅毒是人類的主要性病之一。梅毒患者血清中有兩類抗體;一類是反應素,是IgA與IgM型混合抗體,能與哺乳動物心肌提取的心類脂抗原發生非特異反應,對機體無保護作用,但可供血清學診斷篩選試驗用。另一類是梅毒螺旋體特異性抗體,在厭氧條件下和有補體存在時,能抑制活的梅毒螺旋體運動,並能將其殺死或溶解,可以用來對梅毒進行確證實驗。梅毒螺旋體培養非常困難,故主要用血清學診斷方法進行診斷。

6 分類

血清檢查 > 其他

7 化驗取材

血液

8 梅毒螺旋體制動試驗的原理

用活的梅毒螺旋體Nichols株與患者滅活血清及新鮮補體混合,在厭氧條件下孵育16h,然後在暗視野顯微鏡下觀察有活動力的螺旋體的百分數,並與正常人血清對比。若血清內有梅毒螺旋體抗體,則可抑制梅毒螺旋體,使其失去活動力。若有活動力的螺旋體數爲對照組的40%或40%以下,則爲陽性

9 試劑

本試驗有商品試劑盒。2~10℃避光可保存1年。但試劑瓶開啓後應及時使用。

10 操作方法

(1)用吸收劑對業經56℃水浴30min滅活的被檢血清作1∶5稀釋,充分混勻。

(2)加0.03ml分別用PBS和吸收劑作1∶5稀釋過的非特異性控制血清於固着抗原螺旋體的玻片反應圈內。此爲陰性對照。

(3)加0.03ml經吸收劑作1∶5稀釋過的最小反應性(+)控制血清於玻片反應圈內。此爲陽性對照。

(4)加0.03ml經吸收劑作1∶5稀釋過的被檢血清於玻片反應圈內。

(5)將此玻片置於溼盒內,36℃±1℃,保溫30min。

(6)將玻片置於玻片架上,用PBS(pH值7.2±0.1)衝淋玻片5s,然後浸入此PBS中5min。再拎出、浸沒玻片,濯洗30次。

(7)用業經120℃ 15min消毒的蒸餾水衝淋5min。用吸水紙輕輕將玻片吸乾。

(8)加0.03ml異硫氰酸熒光素標記的抗人IgG(FITC-標記抗人IgG)於每個反應圈內。重複5~7步驟。

(9)加固定液1小滴於玻片上,再覆上蓋玻片,切勿形成氣泡。

(10)將玻片置熒光顯微鏡下,先用鎢燈爲光源,在暗視野下尋找Nichols螺旋體。然後改用高壓汞燈,經濾光片選取紫外光段即可觀看熒光結果。讀片應在4h內完成。

11 正常值

陰性

12 化驗結果臨牀意義

本試驗敏感性和特異性均高,但操作複雜,臨牀上少用,僅用於疑難病人的診斷和研究工作。

13 附註

早期梅毒菌先出現陽性特異性爲94%~100%。

14 相關疾病

梅毒

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