1 概述
這是一組形態相似、功能不同的非均質細胞羣,屬特異性免疫活性細胞,在免疫應答中起核心作用。在一般疾病時數量變化較少,常因血中其他細胞減少或增加而使它所佔比例相對增高或減少。淋巴細胞質的變化較數量增減更有價值,如不測定淋巴細胞的亞羣,則使臨牀意義的判定有一定的侷限性。
3 淋巴細胞計數的醫學檢查
3.1 檢查名稱
3.2 分類
3.3 化驗取材
3.4 淋巴細胞計數的測定原理
用淋巴細胞稀釋液將血液稀釋一定倍數,同時破壞紅細胞並將白細胞胞質染淡紅色。稀釋後滴入計數盤中,計一定範圍內淋巴細胞數,即可直接求得每升血液中淋巴細胞數。
3.5 試劑
下述瑞氏-姬姆薩複合試劑或快速染液可任選一種。
(1)瑞氏-姬姆薩複合染色液:甲液:取瑞氏染粉1g,姬姆薩染粉0.3g,置乾燥清潔研鉢中,另備甲醇(不含水或丙酮)500ml分數次加少量甲醇研磨,分次收集於棕色玻璃瓶中,每天早晚各搖勻3min,經1周後即可應用。乙液(磷酸緩衝液)(pH值6.8~7.0):磷酸二氫鉀(無水)0.3g,磷酸氫二鈉(無水)0.2g,加適量水溶解,校正pH值,加水至1L,可加入0.01%TritonX-100改善染色性。
(2)快速染液甲液:取磷酸二氫鉀6.64g,磷酸氫二鈉2.56g,水溶性伊紅4g(或伊紅B2.5g)加水1L,酚40ml。乙液:亞甲藍4g,高錳酸鉀2.4g,水1L,煮沸,冷後備用。
3.6 操作方法
(1)採血1小滴於載玻片一端,用一推片以35~45°傾斜推出四周留有適量空隙,可分清頭、體、尾的薄血片。血膜長度不少於2.5cm,末梢至玻片另一端尚餘空隙約1cm。血膜幹後染色。
(2)瑞氏姬姆薩複合染色法:平置血片於染色架上,加染色液3~5滴,立即蓋滿血膜,約30s後加緩衝液5~10滴,輕輕搖動玻片或輕輕吹氣使染液與緩衝液混和,5~10min後用水衝去染液,待幹後鏡檢。
(3)快速法:將快速染液甲液、乙液分別置於適當大小染色缸中,將血片先浸入甲液30s,水洗,再浸入乙液30s,水洗,待幹後鏡檢。
(4)鏡檢:選擇血膜體尾交界處,紅細胞已基本不相重疊之處用油鏡檢查,檢查應上下左右有一定方向,並顧及血膜長徑兩側邊緣,否則影響各類細胞的檢出率。計數100~200個白細胞,按其形態分類,並求出百分率。
3.7 正常值
血細胞自動計數儀:(1~4)×109/L (1000~4000/mm3)。
3.8 化驗結果臨牀意義
(1)淋巴細胞增多:
①感染:百日咳、傳染性單核細胞增多症、急性傳染性淋巴細胞增多症、流行性腮腺炎、風疹、結核病、梅毒、急性感染性疾病恢復期等。
②血液病:慢性淋巴細胞性白血病、淋巴肉瘤、重鏈病等。
③內分泌腺疾病:甲狀腺功能亢進、慢性腎上腺皮質功能減退症等。
(2)淋巴細胞減少:
④放射線照射後。
3.9 附註
淋巴細胞減少、嗜酸粒細胞消失,表示感染嚴重、病情較重,預後較差。