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GB 15193.6—2014 食品安全国家标准 哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验
中华人民共和国国家标准GB15193.6—2014《食品安全国家标准哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验》由中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会于2015年01月28日发布,自2015年05月01日起实施,同时替代代替GB15193.6—2003《哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验》。倍的染色单体。c)一次最大灌胃剂量,连续染毒14d。
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GBZ/T 240.9—2011 化学品毒理学评价程序和试验方法 第9部分:体外哺乳动物细胞染色体畸变试验
结束后,吸去含受试样品的培养液,用Hanks液洗细胞3次,加入含10%胎牛血清的培养液,放回培养箱,于24h或48h内收获细胞。4h,加入细胞分裂中期阻断剂(如用秋水仙素,作用时间为4h,终浓度为1μg/mL)。用电动匀浆器制成肝匀浆,再在低温高速离心机上,在4℃条件下,以9000g离心10min,取其上清液分装于塑料管中。
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WS/T 615—2018 辐射生物剂量估算 早熟染色体凝集环分析法
4.2.6固定:每离心管中加入8mL固定液,轻轻吹吸混匀,室温固定20min,250g离心10min,弃上清液。8质量控制:8.1进行早熟染色体凝集制备与分析的实验室应有2名(含)以上专业技术人员,掌握电离辐射生物效应和细胞遗传学基础知识,熟练掌握早熟染色体凝集环显微镜下分析技术。A.1.3光学显微镜:用于分析早熟染色体凝集环。
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GBZ/T 240.12—2011 化学品毒理学评价程序和试验方法 第12部分:体内哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验
——第43部分:神经毒性筛选组合试验;第二次采样时间点仅需设置高剂量。受试样品组细胞染色体畸变率与阴性对照组相比,细胞染色体结构畸变数增加或异常中期分裂相增加,统计学意义上有显著性差异,并呈剂量一反应关系或在一个受试样品组出现染色体畸变细胞数明显增高时,并经重复试验证实,即可认为染色体畸变试验阳性。
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GBZ/T 240.13—2011 化学品毒理学评价程序和试验方法 第13部分:哺乳动物精原细胞/初级精母细胞染色体畸变试验
是否在每个采样时间点均设置阴性对照,可依据动物间的变异和历史对照资料中的精原细胞/初级精母细胞染色体畸变频率判断。一般可选急性经口1/2LD50为高剂量组。将含有许多精子和减数分裂的上清液仔细吸去,留下的曲细精管,重新用10mL低渗液处理10min~精原细胞试验每组动物分别计算染色体结构畸变细胞百分率。
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脆性X 染色体
③表型异常脆性X女性所生的儿子中,分离率为0.5;FMR-Ⅰ基因外显子较小(51~BclⅠ内切酶加StB12.3等探针可检测出含CGG在内的弥散区带,能较好地检出并初步确定前突变的大小。如果使用一些对甲基化敏感的限制性内切酶,如EagⅠ,BssHⅠ,SacⅠ等,则能检测出CpG岛的甲基化,可较好地检测出全突变、前突变及嵌合型。
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染色体
染色体是由线性双链DNA分子同蛋白质形成的复合物,真核生物的核基因就分藏在每条染色体中,所以,染色体是基因的载体,也就是遗传信息的载体。X,Y性染色体;cen着丝粒;2、常染色体数目及形态异常:DOWwn综合征(先天愚型):典型的21三体综合征,有47个染色体,多1个21号染色体,为常染色体异常中最多见的一种核型。
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托马斯·亨特·摩尔根
发现突变的白眼果蝇,花费了摩尔根和他的学生整整两年的时光。例如,携带白眼基因与小翅基因的果蝇,根据连锁原理,产生的下一代应该只有两种类型,要么是白眼小翅的,要么是红眼正常翅的。摩尔根提出,染色体上的基因连锁群并不像铁链一样牢靠,有时染色体也会发生断裂,甚至与另一条染色体互换部分基因。
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细胞遗传学
早期的细胞遗传学着重研究分离、重组、连锁、交换等遗传现象的染色体基础以及染色体畸变和倍性变化等染色体行为的遗传学效应,并涉及各种生殖方式如无融合生殖、单性生殖以及减数分裂驱动等方面的遗传学和细胞学基础。孟德尔定律揭示了以有性生殖为基础的遗传学规律。
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物理图
物理图是指标明一些界标(例如限制酶的切点、基因等)在DNA上的位置,图距以物理长度为单位,例如染色体的带区、核苷酸对数目等。(2)YAC克隆:YAC是由质粒pBR322、酵母的着丝粒、四膜虫rDNA的端粒、酵母的自主复制序列(ARS)以及一些选择标记基因构成。呈环状结构时,可以质粒方式在原核细胞中增殖复制。
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单体
在人类,(45,XO)属于性染色体单体,虽然能活,但表现出女性染色体异常疾病,即所谓特纳氏综合征(Turner′ssyndrome)(身材矮小,原发性闭经,性幼稚,蹼颈,后发际低,宽乳距,肘外翻等)。例如,具有隐性基因ey(无眼)的果蝇纯合体,与野生型正常眼的“单体IV果蝇”杂交,子一代正好是,野生型数:无眼型数=1∶1。
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性染色体
高等动物有明显的性别差异,某些动物的雌体和雄体的每个细胞里,都有一对性染色体,它们的形态、大小和结构随性别的不同而不同。X染色体和Y染色体有同源部分,也有非同源部分,同源和非同源部分都含有基因,但因Y染色体上的基因数目很少,所以一般位于X染色体上的基因在Y染色体上没有相应的等位基因。
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细胞分类学
一个个体或种的全部染色体的形态结构,包括染色体的数目、大小、形状、主缢痕和副缢痕等的总和称为染色体组型,亦称“核型”。
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染色体多态性
染色体的多态性又称异态性(heteromorphism)是指正常人群中经常可见到各种染色体形态的微小变异。这种变异主要表现为同源染色体大小形态或着色等方面的变异。例如表现的D和G组的随体增大、重复(双随体)或缺如,短臂的长短,1、9、16号染色体的次缢痕区加长或缩短,染色体着线粒区的荧光强度变异等。
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单体性
单体性是二倍体的体细胞染色体数目为(2n-1)的现象,是低数性的一种。把这种在1对同源染色体中缺失其中一条而仅存的另外一条染色体称为单染色体(monosome)。单体性的例子如已知异源六倍体的普通小麦(2n=6x=42),可能有的21种单体性植物(monosomics);
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单价染色体
减数分裂中未配对的游离染色体,在单倍体或杂种中常可见到,由于没有同源染色体存在,所以不能配对,因此就成为单价染色体。通常单价染色体比二价染色体行动迟缓,在第一次减数分裂中期时偏离赤道板,在第一次减数分裂后期或不纵裂而移到一极,或纵裂而分向两极,或成为静止染色体。
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DNA复制起点
DNA复制起点不论细胞中只含有一条染色体(原核生物)还是有多条染色体,细胞每次分裂时每一条染色体都要精确地复制一次,也就是构成染色体的DNA分子要复制一次。细菌细胞里的质粒也有自己的复制子,有的受控于细菌细胞而同细菌染色体同步复制,这种质粒称为严紧型质粒;哺乳动物线粒体的D—环突约有500~
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性别决定
性别决定是指雌雄异性的动物决定性别的方式。性别决定发生在受精的过程中,对人类来说取决于X型精子还是Y型精子与卵细胞结合,受精作用一经完成,性别也就决定了。如青蛙等低等脊椎动物,即使性染色体组成为XY,但在温度较高的环境中也会发育成雌蛙,在温度较低的环境中,即使性染色体组成为XX,也会发育成雄蛙。
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粗线期
粗线期是指在减数第一次分裂前期中紧接偶线期的时期。在这一时期,已完成染色体联会的两条同源染色体互相紧靠,进而缠绕在一起,基质开始附着到染色丝上,成为一条短而粗的染色体。不久,这些紧靠着的一对染色体各自明显地发生纵裂,各自由两条染色单体构成,成为四重结构。这种DNA与偶线期合成的DNA不同,它没有特异性。
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有丝分裂
有丝分裂是细胞周期的丝裂期(M期)进行的分裂活动。据形态变化的特征,通常将有丝分裂分为前期、早中期、中期、后期和末期。根据细胞内染色体的形态和DNA合成情况,又可将间期划分成:G1期——此时没有DNA复制,但有RNA和蛋白质合成。末期I:进入子细胞中的染色体含有两条染色单体。在后期Ⅱ,染色体的行为发生重要变化。
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人工染色体
基于ARS、CEN、TEL是线性染色体稳定的功能序列,人们利用这些序列构建载体,重组后的DNA以线性状态存在,这样不仅稳定,而且大大提高了插入外源基因的能力,并且可以像天然染色体一样在寄主细胞中稳定复制和遗传,称为人工染色体。
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核小体
核小体又称核体、核粒,是染色质的基本结构单位。146个碱基对的DNA包绕在小圆盘外面绕13/4圈。不同组织、不同类型的细胞,以及同一细胞里染色体的不同区段中,盘绕在组蛋白八聚体核心外面的DNA长度是不同的。这些基本功能是由真核生物染色体三种特定的DNA序列所控制,即DNA复制起点、着丝粒和端粒。
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遗传性疾病
遗传性疾病(hereditarydisease,inheriteddisease,geneticdisease)简称遗传病,是指生殖细胞或受精卵的遗传物质(染色体和基因)发生突变(或畸变)所引起的疾病,通常具有垂直传递(verticaltransmission)的特征。③不是任何细胞的遗传物质改变都可以传给下代,所以必须强调生殖细胞或受精卵的遗传物质发生改变。
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异态性
染色体的多态性又称异态性(heteromorphism)是指正常人群中经常可见到各种染色体形态的微小变异。这种变异主要表现为同源染色体大小形态或着色等方面的变异。例如表现的D和G组的随体增大、重复(双随体)或缺如,短臂的长短,1、9、16号染色体的次缢痕区加长或缩短,染色体着线粒区的荧光强度变异等。
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端粒
端粒通常是由富含鸟嘌呤核苷酸(G)的短的串联重复序列组成,伸展到染色体的3,端。端粒酶最早是在四膜虫(Tetrahymena)中发现的。端粒的长度决定了细胞的寿命,因此可用丢失的端粒重复序列的长度来推测细胞有丝分裂的次数,所以端粒被称为分子钟或有丝分裂钟(mitoticclock)。
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2009年诺贝尔生理学或医学奖
2009年诺贝尔生理学或医学奖由美国科学家伊丽莎白·布莱克本、卡萝尔·格雷德和杰克·绍斯塔克获得,获奖的理由是“发现端粒和端粒酶是如何保护染色体的”。相反,如果端粒酶活性很高,端粒长度就会维持,细胞衰老就会延迟,在癌细胞中就是这种情形,可被认为具有永生。伊丽莎白·布莱克本拥有美国和澳大利亚双重国籍。
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接合
接合是细菌通过细胞的暂时沟通和染色体或质粒DNA转移而导致基因重组的过程。通过实验排除了回复突变、转化和互养的可能性,从而证明这些原养型细胞是由两个不同基因型的大肠杆菌细胞相互接触而导致染色体DNA的转移和重组所产生的重组体。(3)细菌接合后形成的是部分合子,而不是雌雄配子的两套染色体。
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生物地理学
可分为动物地理学和植物地理学(细胞水平则有细胞地理学),其任务是阐明地球表面的不同部分分布着各种动物区系和植物区系的地理学原因,为生态平衡、生物资源的调查、保护、开发、利用提供理论依据。基于上述可看出:利用染色体资料来研究某一类群的起源进化、分布,比传统的形态地理学方法要科学得多。
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畸形
畸形是胚胎发育期间由于受内在或外部某些不利因素的影响,致使胎儿在形态结构和生理功能上呈现的异常。由受精卵经卵裂、囊胚至胚层分化期,致畸因子可导致胚胎受损甚至死亡,但不出现畸形;遗传因素是来自双亲染色体遗传物质的异常导致畸形的发生,包括染色体数目异常、染色体结构异常(染色体畸变)及基因突变。
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随体
随体是位于染色体末端的、圆形或圆柱形的染色体片段,通过次缢痕与染色体主要部分相连。它是识别染色体的主要特征之一。根据随体在染色体上的位置,可分为两大类:随体处于末端的,称为端随体;
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核仁组织区
细胞核特定染色体的次缢痕处,含有rRNA基因的一段染色体区域,与核仁的形成有关,故称为核仁组织区。核仁是NOR中的基因活动而形成的可见的球体结构。具有核仁组织区的染色体数目依不同细胞种类而异,人有5对染色体即13、14、15、21、22号染色体上有核仁组织区。
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微核
微核(micronucleus)是指在细胞的有丝分裂后期染色体有规律地进入子细胞形成细胞核时,仍然滞留在细胞质中的染色单体或染色体的无着丝点断片,或因纺锤体受损而丢失的整条染色体。它在末期以后,单独形成一个或几个规则的次核,被包含在子细胞的胞质内而形成,因比主核小,故称为微核。
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染色体早熟凝集
将处于分裂期(M期)的细胞与处于细胞周期其他阶段的细胞融合,使其他期细胞的染色质提早包装成染色体,这种现象称为染色体早熟凝集(prematurechromosomecondensation,PCC)。由于G1、S、G2的DNA复制状态不同,早熟凝集的染色体的形态各异,如与M期细胞融合的G1期的染色体为单线状,S期为粉末状,G2期染色体为双线。
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抑癌基因
抑癌基因是一类抑制细胞过度生长、增殖从而遏制肿瘤形成的基因。同时,抑癌基因的丢失或失活也可能导致肿瘤发生。这意味着癌基因即使有其野生型等位基因存在时,对细胞的转化效应在遗传上似是显性。仔细分析了恢复致癌能力的杂合细胞的染色体后,发现这些杂合细胞总是丢失了来自正常细胞的某条染色体。
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连锁群
连锁群是位于同一染色体上的基因群。已知基因存在于染色体上,而染色体数目是有限的,基因的数目却很大。迄今所知,一个物种的基因连锁群数决不会超过这个物种的染色体对数。玉米的染色体对数是10,它的基因连锁群也是10;豌豆的染色体对数是7,它的基因连锁群也是7等等。
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后期
后期是有丝分裂的一个时期,这一时期的主要特点是:着丝粒分开,染色单体移向两极。在后期的开始阶段,每一染色体的着丝粒在纺锤体微管的作用发生断裂,进而造成染色单体分开,并移向两极。在后期A,染色体运动的力主要是由动粒微管的去装配产生的,此时的染色体运动称为向极运动。
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雌雄同体现象
雌雄同体动物的卵和精子,其染色体数通常是相同的,没有异型的性染色体,但是也有的动物如茗荷(Lepasanatifera)(2n=2b)的卵和精子,其染色体数虽相同,但卵的染色体比精子的染色体大3-4倍,前面列举的Angiostomumnigroveno-sum其精巢组织形成时,有一个染色体失去活性,不久便消失。
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同源染色体
指减数分裂时发生配对的染色体。基因数目一样,而同样的基因或等位基因又是以同样顺序排列着的称为完全同源的染色体。部分同源的染色体只是在同源部分能够配对,非同源的部分是分离的,所以常形成一端接在一起的二价染色体。二倍体是具有二个同源染色体,分别来自双亲的配子。自然的多倍体多具有部分同源染色体。
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X染色体失活
具有三条X染色体的女性(X三体征),在体格和智力上常常都正常。DNA结构DNA结构DNA(脱氧核糖核酸)是细胞的遗传物质,存在于细胞核中的染色质上。它由糖(脱氧核糖)和磷酸分子组成两条单链,由称为碱基的四种成对的分子连接,碱基构成楼梯的阶梯。在阶梯中,腺嘌呤与胸腺嘧啶配对,鸟嘌呤与胞嘧啶配对,每对碱基由氢链连接。
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不等交换
不等交换是发生在联会时略有参差的两条染色体区段间的交换。这种不等交换最早是在果蝇的棒眼研究中发现的,重棒眼是由于果蝇X染色体上有3个16A区的重复,这种重复就是由于不等交换产生的。由于重复而多余的基因可一再突变成为新基因,因此不等交换被认为是进化过程中新基因的来源之一。
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大染色体
原生动物的原纤毛类蛙片虫(Opalina)、双核蛙片虫(Zelleriella)等的细胞中存在许多同形的核,在核分裂时每个核中都会出现一定数目的大小不同的二种染色体,各具有独立的变化形式。一般认为大染色体具有和大核即营养核一样的功能,而小染色体则具有和小核即生殖核一样的功能。
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遗传距离
遗传距离是1910年,MorgenTH提出假设:假定沿染色体长度上交换的发生具有同等的几率,那么两个基因位点间的距离可以决定减数分裂过程中发生重组染色体的发生率,即重组分数。它是构建物理遗传图谱的基础,也是利用连锁分析将基因序列从染色体上搜寻出来的位置克隆法的基础。
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单性生殖
单性生殖亦称单性发生或孤雌生殖。关于二倍体单性生殖,自从O.Juel(1898-1900)发现蝶须属胚囊母细胞不进行减数分裂而能形成胚囊,双倍卵细胞进行单性生殖而能产生完整个体以来,已知有蕺菜(柴田桂太、三宅恒方,1908)、赤杨、姬女菀、蒲公英、宿根早熟禾等,许多苧麻类或苦菜虽是三倍体,但均是以这种方式繁殖的。
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细胞质遗传
生物的大多数性状是受染色体上的DNA控制的,染色体上的DNA存在于细胞核内,受核内DNA控制的遗传叫做细胞核遗传。细胞质基因控制的性状在遗传中,后代总是表现出母本相似的性状。如果假定甲品种作父本和乙品种作母本相交定为正交,则以乙品种作父本和甲品种作母本相交则为反交,如果正反交结果不同,可判断为细胞质遗传。
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巨大染色体
某些生物的细胞中,特别是在发育的某些阶段,可以观察到一些特殊的染色体,它们的特点是体积巨大,细胞核和整个细胞体积也大,所以称为巨大染色体,包括多线染色体和灯刷染色体。
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相互易位
相互易位的杂合子即具有未曾易位的正常染色体与已发生易位的染色体的个体,在减数分裂时可形成染色体环或染色体链。位在发生易位断片上的基因位点就会脱离易位前所属的那个连锁群。在一粒小麦和玉米中,人工的X射线照射可诱发相互易位,进一步这些发生相互易位的染色体会合在一起形成大形的染色体环。
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重建核
重建核是指在有丝分裂中期或后期由于核错误分裂,子染色体未分配而形成的一个核。其结果,是形成染色体数加倍的核。其原因是由于在减数分裂中,由一价染色体、染色单体桥等所造成的染色体的延迟。在体细胞分裂中,可用秋水仙碱人为地引起重建核。
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端粒顺序
端粒顺序是线性染色体两端的特殊序列,这种序列广泛分布在原生动物、真菌、植物和哺乳动物的染色体中,并且在序列组成上十分相似,富含G,且由短的基本序列随机串联重复而成。端粒是由端粒酶合成的。同时在染色体的两端形成保护性的帽结构,使染色体的DNA免受核酸酶和其他不稳定因素的破坏和影响。
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凝集期
细线期(leptotenestage)是减数分裂前期Ⅰ的一个时期,又称凝集期(condensationstage)。此期在光学显微镜下可逐渐见到染色体,染色质在凝集前已复制,但仍呈单条细线状,看不到成双的染色体。对玉米细胞的减数分裂的研究发现,玉米细线染色体的端粒开始是分布在整个细胞核中,在邻近细线期结束时,端粒定位到核膜的内侧。
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细线期
细线期(leptotenestage)是减数分裂前期Ⅰ的一个时期,又称凝集期(condensationstage)。此期在光学显微镜下可逐渐见到染色体,染色质在凝集前已复制,但仍呈单条细线状,看不到成双的染色体。对玉米细胞的减数分裂的研究发现,玉米细线染色体的端粒开始是分布在整个细胞核中,在邻近细线期结束时,端粒定位到核膜的内侧。