4 紅細胞電泳時間的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 紅細胞電泳時間的測定原理
紅細胞表面帶負電荷,在電場中向正極移動,此即細胞電泳,其電泳率(EPM)計算如下:
(公式1)
式中E爲電場強度(V/cm),V爲電泳速度(μm/s)。因此細胞電泳遷移率的含意是指荷電顆粒在單位電場強度下,單位時間內泳動的距離(μm·s-1/V·cm-1)。
在溶液中帶負電荷的細胞周圍含有相反的電荷,兩種電荷相互吸引,從而在細胞周圍形成雙電層,當細胞在電場中泳動時,雙電層間出現一種電位(稱Zata電位)。Zata電位與EPM有如下關系:
(公式2)
式中η爲液體的黏度,ε爲液體介電常數。表面電荷密度與Zata電位有如下關系:
(公式3)
式中N爲阿伏加德羅常數,D爲溶液的介電常數,K爲玻爾茲曼常數,T爲絕對溫度,Z爲離子價,e爲電子荷電量,Sinh爲雙曲函數符號,即等於。
4.4 試劑
細胞電泳儀主要由直流電源、電極,電泳室及顯微鏡等部分組成。目前國內大多采用方形玻璃毛細管作爲電泳小室。
(1)電泳小室:採用長7~8cm,內徑1mm,內徑均勻的方形毛細管,其靜止層在內徑1/10深度處。
(2)電極:一般採用銀電極,爲防止電極極化最好採用銀-氯化銀電極。
銀-氯化銀電極製作。將表面光潔的銀絲用乙醇或乙醚擦洗乾淨,以銀絲作陰極,銀片作陽極與1.5V電池連接,兩電極均浸於0.1mol/L鹽酸溶液中,於暗處電解1~2h,銀絲表面便有一層紫黑色氯化銀,保存於暗處備用。
(3)瓊脂導管制作:取內徑略大於方形玻璃管的硬質塑料管,切成2~3cm,長,注入1%的瓊脂溶液(其中氯化鈉的濃度爲10%),冷卻後備用。
(4)紅細胞懸浮液的配製:取靜脈血,以肝素或EDTAK2抗凝,於2000r/min離心10min,取出血漿放入小試管內,加入1滴血使其中紅細胞的含量每微升1萬個左右備用。也可以生理鹽水或9%的蔗糖溶液作懸浮基體。但由於生理鹽水離子強度高,導電性強,工作電流較大,故易生熱,而影響測量結果。
4.5 操作方法
(1)將配製好的稀釋的細胞懸浮液裝入方形玻璃管中,然後兩端套好瓊脂管,裝在電泳管架上後置於顯微鏡臺上,並插入電極。
(2)接通電泳:利用倒向開關變換兩電極的極性,利用測微尺,測量細胞泳動一定距離(s)所需要的時間(),記錄20個細胞在兩端方向泳動時間的平均值(),計算電泳速度(v),V=s/,利用公式(1)、(2),(3)可計算出細胞屯泳遷移率和細胞表面電荷密度。
4.6 正常值
15.02~17.32s。
4.7 化驗結果臨牀意義
時間延長:缺血性腦卒中、心肌梗死、心絞痛、冠狀動脈粥樣硬化性心臟病(冠心病)、閉塞性血栓性脈管炎(脈管炎)、肺心病、高血壓、慢性支氣管炎。
4.8 附註
影響血液黏稠度因素繁多,除血漿和血清中含有電解質、各種蛋白質、糖類、脂類以及球形鏈狀高分子化合物外,還有紅細胞的大小及形態,同時受地點、溼度、氣候、季節、時差、環境因素的影響。