3 概述
傷寒、副傷寒患者發病12天後血清中可產生特異性抗體,並逐漸上升,至第4周達高峯,以後逐漸下降。肥達反應,又稱傷寒血清凝集試驗,是診斷傷寒和副傷寒的血清學試驗,以檢查血清中抗體效價及其增長幅度。
8 肥達反應的原理
人類感染傷寒或副傷寒沙門菌後,約經1~2周即可在血清中出現抗體(凝集素),此種抗體與傷寒、副傷寒沙門菌相混合,在適當電解質參加下可出現凝集現象。肥達反應是用傷寒沙門菌的H(鞭毛)和O(菌體)以及甲型(A)與乙型(B)副傷寒沙門菌的標準液與病人血清做凝集試驗,常用於傷寒、副傷寒的輔助診斷。
9 試劑
(1)診斷菌液:生物製品研究所有商品供應。一般包括傷寒沙門菌H、O,副傷寒沙門菌A、B。用前按使用說明稀釋至適當濃度(一般爲每毫升含10億菌體)。但應注意有效期限,如出現自凝者不應使用。
(2)被檢血清(可以不加溫滅能)。
(3)生理鹽水(8.5g/L)。
10 操作方法
(1)準備4排小試管,每排7支,標明記號。
(2)另取中號試管1支,加入生理鹽水3.8ml及被檢血清0.2ml(吸注液應將吸管外壁拭淨,注液時把吸管插至管底,以防過多沾於試管內壁)。
(3)用吸管將上述二者混勻(需用吸管連續吸注3次,吸時深入液麪下,注時離開液麪)使成1∶20的血清稀釋液。
(4)吸取上述1∶20血清稀釋液2ml,按每管0.5ml液量分別加入各排
之第1管。
(5)於上述中號試管內加入生理鹽水2ml並混勻,此種血清經2倍稀釋(由1∶20稀釋成1∶40)。
(6)再吸取此1∶40血清稀釋液2ml,按每管0.5ml液量分別加入各排之第2管。
(7)如此連續稀釋到各排第6管爲止。各排的第7管只加生理鹽水0.5ml,不加血清,作爲抗原對照。此時各排第1至第6管的血清稀釋度依次爲1∶20、1∶40、1∶80、1∶160、1∶320、1∶640。
(8)將前述的四種診斷菌液分別加於1、2、3、4各排的每一試驗管及抗原對照管內,每管0.5ml。此時各排第1至第6管的血清加入等量菌液而又稀釋1倍,血清最後稀釋度已成爲1∶40、……1∶1280。
(9)將所有試管搖勻後,置37℃溫箱或水浴過夜(或56℃2~4h)以促進反應,按時觀察結果。
12 化驗結果臨牀意義
(1)升高:
②O及A、B、C其中之一凝集價升高時,可診斷副傷寒甲或乙或丙型。
A.曾注身接種傷寒疫苗者。
B.曾患過傷寒病者。
D.其他沙門菌屬感染者。
(2)注意事項:
①發病第1周者50%陽性,第2周者80%陽性,第4周者90%以上陽性,故應多次檢查,若凝集價隨病程遞增,纔有診斷價值(病程早期和晚期)。