3 概述
超氧化物歧化化物歧化酶(SOD)是體內重要的自由基-超氧自由基O2-的天然清除劑,是免除自由基損傷的主要防禦酶。自1969年McCord等發現以來已引起醫學界極大關注。隨着SOD測定方法的不斷改進和完善,其在臨牀上的應用日趨廣泛。大量臨牀資料證實,SOD與人體生理病理以及各種疾病的發生、發展有着密切聯繫。
超氧化物歧化酶是催化超氧化物離子O2-的歧化反應2O2-+2H→O2+H2O2的酶。EC1.15.1.1。是金屬酶,已知在金屬酶中有真核生物細胞質的深綠色Cu-Zn酶(分子量約3萬)、線粒體、細菌紅紫色的Mn酶(分子量約4萬或約8萬)和大腸桿菌黃褐色的Fe酶(分子量約4萬)。已經瞭解血液中的銅蛋白血銅蛋白輔基就是這樣的一種酶。通常認爲超氧化物是還原物質的自動氧化或放射線照射的氧分子所生成的,是一種極不穩定的、反應性極強的物質,可以保護生物組織免受放射性傷害。這種酶存在於所有的好氧性生物中,在厭氧性主物中未被發現。
4 超氧化物歧化酶的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 超氧化物歧化酶的測定原理
超氧化物歧化化物歧化酶是一類廣泛分佈於生物體細胞內的金屬酶,它能特異催化超氧化物陰離子(O2-)發生歧化反應:,H2O2再經過氧化化氫酶(CAT)作用,轉化成H2O和O2,從而清除O2的毒性作用。人體內的SOD按其輔基不同,可分爲CuZn-SOD和Mn-SOD,前者存在於所有的組織細胞內,後者則存在於除紅細胞外的所有細胞的微粒體和胞液中。CuZn-SOD性質穩定,易分離純化,可溶於氯仿、乙醇和丙酮中,耐熱,不受蛋白酶水解,人體組織中CuZn-SOD含量差異較大,以肝和大腦皮質爲最高。CuZn-SOD經聚丙烯酰胺凝膠電泳發現有SOD1和SOD2兩條區帶,大部分人羣是正常的SOD1的純合子,雜合子者爲SOD1和SOD2,但極少數人是純合子SOD2。Mn-SOD對熱和化學試劑均較CuZn-SOD敏感,氯仿和乙醚處理即遭破壞。高等生物Mn-SOD含有4個亞基,活性部位含錳,靜止狀態酶錳爲Mn3+。Mn-SOD催化反應和CuZn-SOD相似,但在鹼性pH下,Mn-SOD速率常數下降。在正常情況下,體內大部分組織中的O2可被SOD清除,與其產生保持平衡,當O2-產生過量或抗氧化酶系統功能降低時,過量的O2。可使細胞受損,引起機體一系列生理及病理改變。
4.4 試劑
同酶速率法、鄰苯三酚法、聯大茴香胺法測定。
4.5 操作方法
同酶速率法、鄰苯三酚法、聯大茴香胺法測定。
4.6 正常值
(1)酶速率法(37℃):血清:242~620U/L;紅細胞:5375~7975μg/g·Hb。
(2)鄰苯三酚法:心肌:300.3~406.3U/g;紅細胞:1567~2241U/g。
(3)聯大茴香胺法:心肌:1745~2231U/g;紅細胞:2906~4654U/g。
4.7 化驗結果臨牀意義
(2)顯著升高:肝癌。
(3)降低:病毒性心肌炎、兒童肺炎、貧血、溶血性疾病、糖尿病、類風溼性關節炎、蛛網膜下腔出血、心臟移植等。
4.8 附註
(1)紅細胞超氧化物歧化化物歧化酶(Superoxide dismutase)抽提液需清晰,若混濁則干擾酶活性測定,結果下降。
(2)紅細胞SOD測定時,實驗溫度控制在22~25℃,大於25℃酶活性下降。
(3)測定白細胞SOD活性時,待測標本不能溶血,已分離出的白細胞中不能混入過多紅細胞。