3 試劑
取磷酸二氫鈉2.5g、無水磷酸氫二鈉1.0g與氯化鈉8.2g，加水使成1000ml。
(3) 水解明膠
取明膠50g，加水1000ml，在121℃加熱90分鐘，然後冷凍乾燥。
(4) 水解明膠稀釋液
取磷酸鹽緩衝液與水各250ml，加水解明膠330mg，搖勻，在0～4℃保存。如溶液不發生渾濁，可繼續使用。
(5) 血清貯備液
取新鮮牛血清或凍幹牛血清(先用水溶解並稀釋至標示量體積)1份，加醋酸－醋酸鉀緩衝液9份稀釋，再以4mol/L鹽酸溶液調節pH值至3.1，放置18～24小時後再用。在0～4℃保存，可應用30日。
血清貯備液中血清總固體(取牛血清適量，置裝有潔淨砂粒並在105℃乾燥至恆重的坩堝中，置水浴上蒸乾後，再在105℃乾燥至恆重)在8％左右者,取1份,用醋酸－醋酸鉀緩衝液3份稀釋；血清總固體在5％左右者，取1份，用醋酸-醋酸鉀緩衝液2份稀釋；臨用時配製。
(7) 玻璃酸鉀貯備液
6 標準曲線的製備
取大小相同的試管12支，按順序加入標準品溶液0.00、0.10、0.20、0.30、0.40與0.50ml，每份2支；再依次相應加入水解明膠稀釋液0.50、 0.40、0.30、0.20、0.10與0.00ml，每隔30秒鐘順序加入玻璃酸鉀溶液0.50ml，使每一管的總體積爲1.00ml,搖勻，置37±0.5水浴中；每管準確保溫30分鐘後，每間隔30秒鐘順序取出，立即順序加入血清溶液4.0ml, 搖勻，在室溫放置30分鐘，搖勻，在640nm的波長處測定吸收度；同時以磷酸鹽緩衝液0.50ml代替玻璃酸鉀溶液,加水解明膠稀釋液0.50ml,搖勻，按上述方法自 “置37±0.5℃的水浴中”起同樣操作，作爲空白。以吸收度爲縱座標，標準品溶液的單位數爲橫座標繪製標準曲線。