2 英文參考
Urine—Determination of selenium—Hydride generation-atomic absorption spectrometric method
中華人民共和國衛生行業標準 WS/T 47—1996《尿中硒的氫化物發生-原子吸收光譜測定方法》（Urine—Determination of selenium—Hydride generation-atomic absorption spectrometric method）由中華人民共和國衛生部於1996年10月14日發佈，自1997年05月01日起實施。
6 4 試劑
本標準所用試劑除另有說明者外，均爲分析純試劑。
4.2 硝酸，ρ20=1.42g/mL，高純。
4.3 硫酸，ρ20=1.84g/mL，優級純。
4.4 高氯酸，ρ20=1.75g/mL，高純。
4.5 鹽酸，ρ20=1.19g/mL，高純。
4.6 氫氧化鈉。
4.7 硼氫化鈉（NaBH4）。
4.8 二氧化硒（SeO2），高純。
4.11 硼氫化鈉溶液，1%:稱取10g硼氫化鈉和1g氫氧化鈉，用水溶解並稀釋至1000mL。
4.13 硒標準溶液：稱取0.1405g二氧化硒，溶解於10mL水中，加1mL硝酸，用水稀釋至100mL．混勻。此溶液爲1mL=1000μg硒標準儲備液。臨用前，用此溶液逐級稀釋成1mL=0.5μg硒標準應用液。
4.14 質控樣：用標準尿樣、加標的模擬尿、接觸者混合尿或加標的正常人混合尿作質控樣。
8 6 分析步驟
8.1 6.1 儀器操作條件
參照下列儀器操作條件，將原子吸收分光光度計調節到最佳測定狀態。
波長 196.0nm
乙炔流量 2.0L/min
狹縫 1.3nm
氬氣流量 0.2L/min
燈功率 10mA
空氣流量 9.5L/min
取樣時間 45s
計算時間 20s
8.2 6.2 樣品處理
取2mL尿樣於50mL燒杯中，加入2mL混合酸，蓋上表面皿，置電熱板上，在200℃±10℃下加熱消化，待冒白煙後立即取下，冷卻後，用6mol/L的鹽酸溶液定量轉移到25mL刻度試管中，並加同一鹽酸溶液至刻度，混勻，於沸水浴鍋中加熱30min。
8.3 6.3 空白試驗
取2mL水代替尿樣，按6.2條步驟處理。
8.4 6.4 標準曲線的繪製
6.4.1 取6個燒杯，按下表配製標準管。
尿硒標準管的配製
管 號 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
硒標準溶液（4.13），μL | 0 | 10 | 20 | 40 | 60 | 80 |
正常人混合尿，mL | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
硒濃度，μg/L | 0 | 2.5 | 5.0 | 10.0 | 15.0 | 20.0 |
6.4.2 將氫化物發生系統相應的吸液泵分別插入6.4.1、10%的鹽酸溶液和1%硼氫化鈉溶液中·參照6.1條件，啓動氫化物發生系統，自動吸入樣品、鹽酸溶液和硼氫化鈉溶液於混合反應管中。產生的硒化氫用氬氣輸送到乙炔-空氣火焰上的石英管中進行測定。
6.4.3 以加入標準的硒濃度爲橫座標，測得的峯高值減去對照樣的峯高值作爲縱座標，繪製標準曲線。
8.5 6.5 樣品測定
9 7 計算
7.1 按式（1）計算尿樣換算成標準比重（1.020）下的濃度校正係數（k）。
7.2 按式（2）計算尿中硒的濃度。
式中：X——尿中硒的濃度，μg/L。
c——由標準曲線查得的硒濃度，μg/L。
10 8 說明
8.1 本法的最低檢測濃度0.7μg/L；尿樣測定精密度CV=1.9%～6.7%（n=6）；尿樣加標回收率90%～108%，能準確地測定人尿標準樣品。
8.2 採樣問題：硒的生物半衰期較長，最好採集晨尿，以避免污染。尿樣採集後立即以100：1（V/V）加入硝酸（4.2），在4℃至少可以保存14天。
8.3 影響測定的因素．尿樣的消化十分關鍵，要特別注意消化溫度，溫度超過210℃會導致硒的大量損失，要待電熱板的溫度上升到所需的消化溫度200℃左右才能將樣品置於其上消化。氫化物發生的條件和操作程序應根據所使用氫化物發生系統的類型和型號而定，自行選擇最佳的鹽酸溶液、硼氫化鈉溶液濃度和氬氣流量。
8.4 共存物的干擾及去除，尿中砷的濃度在125μg/L以上會產生一定的負干擾，但一般尿樣中砷的含量未能達到此水平，如果尿中砷的濃度較高，適當稀釋尿樣便可以消除干擾。
8.5 尿樣含硒量超出測定範圍，可將樣品液（6.3）增加稀釋度後進行測定，計算時乘上稀釋倍數。
8.6 質控樣用標準尿樣、加標的模擬尿、加標的正常人尿時可以考察準確度和精密度，用接觸者尿時可以考察精密度。但人尿不易久存。模擬尿只含人尿的大量成分。