3 概述
TORCH是指一組病原體:TO指弓形蟲、R指風疹病毒、C指鉅細胞病毒、H指單純皰疹病毒。本檢查常作爲婦女懷孕期生殖道感染的常規檢查項目,若感染了會引起流產、早產、胎兒宮內死亡、胎兒腦積水、神經發育障礙、先天性心臟病等,對優生優育和習慣性流產的病因分析有參考價值。
6 TORCH檢查的原理
補體結合試驗法:抗原抗體複合物可以結合補體,這是補體結合試驗的依據。綿羊紅細胞和其相應抗體(溶血素)的複合物結合補體後出現溶血現象。因此,綿羊紅細胞和溶血素被作爲補體結合試驗中判斷待測系統中有無抗原抗體反應的複合物系統。如待測系統產生抗原抗體複合物,則可結合一定量補體,此時加入溶血系統則不出現溶血。如待測系統中只有抗原或抗體,不能結合補體,加入溶血系統則與遊離補體結合而發生溶血,這就是補體結合試驗的基本原理。
7 試劑
(1)巴比妥緩衝液(BBS):稱取氯化鈉85.0g,氯化鎂六水合物1.68g,氯化鈣0.28g,巴比妥5.75g,巴比妥鈉2.0g,先將巴比妥加入500ml水中加熱溶解後,再加其他成分,補加水至2000ml,此爲保留液,用時稀釋5倍。
8 操作方法
①取補體1ml,加BBS 9ml,依次稀釋成1∶20,1∶30,1∶40,1∶50,1∶60,1∶80,1∶100,1∶200,1∶400,同時取50%的溶血素0.2ml,加BBS 9.8ml,即爲1∶100的溶血素,然後繼續稀釋成1∶800,1∶1600,1∶3200,1∶6400。
②採取方陣排列試管,縱行各管加不同濃度的補體0.1ml,橫排各管加溶血素0.1ml(皆應從最高稀釋度加起)混勻後,各管加BBS 0.2ml,補體和溶血素對照管各加BBS0.3ml,最後在各管中加2%羊紅細胞0.1ml。各管總量爲0.5ml,搖勻,放37℃水箱中30min,觀察結果。茲舉一例說明(表1):
以完全溶血的補體和溶血素最高稀釋度爲各自的單位。上表(表1)中溶血素1∶3200爲一個溶血素單位,補體1∶80爲一個補體單位。在實際應用時,溶血素用2u(3200÷2=1600),補體用2.5u(80÷2.5=32)。
(2)正式試驗:
①用V型微量反應板操作,每份標本作一個試驗孔,一個血清對照孔。各孔內先加BBS 0.025ml。
②用稀釋棒蘸取血清(0.025ml)加入第一孔,旋轉後移入第二孔,共八孔,如此可得1∶2~1∶256稀釋。
③按下表(表2))加入各試劑:
(3)結果判斷:凡對照組各管的結果應符合以下情況,否則應重做。
補體對照管:2.5u=0,1u=0~±,0.5u=3~4。羊紅細胞對照管:4。抗體對照管:0。陰性對照管;1∶2~1∶256=0。陽性對照管:同一份陽性血清,每次結果應一致。
9 正常值
陰性。
10 化驗結果臨牀意義
陽性:見弓形蟲、風疹病毒、鉅細胞病毒、單純皰疹病毒的有關內容。
1.弓形蟲感染 弓形蟲感染是一種人畜共患疾病,貓與其他動物是傳染源。後天感染輕型者常無症狀,但血清中可查到抗體;重型者可引起各種症狀,如高熱、肌肉或關節疼痛、淋巴結腫大等;通過胎盤宮內感染者可引起死胎、早產,出生後可表現一系列中樞神經系統症狀以及眼、內臟的先天損害。
2.風疹病毒 孕婦感染風疹多在懷孕l~6周時,除可致流產、死亡外,所生嬰兒還可發生先天性風疹綜合徵。lgM抗體陽性提示有近期感染,必要時應終止妊娠。
3.鉅細胞病毒lgM抗體陽性提示病人近期有鉅細胞病毒感染,但應結合臨牀情況進行具體分析。
4.單純皰疹病毒 主要引起皰疹性口腔炎、溼疹性皰疹、皰疹性角膜結膜炎、新生兒皰疹、皰疹性外陰陰道炎等。生殖器官以外的感染多由單純皰疹病毒-Ⅰ型引起,而生殖器官的感染多由單純疤疹病毒-Ⅱ型引起。本試驗不能區分單純皰疹病毒-Ⅰ型或單純皰疹病毒-Ⅱ型。lgM抗體陽性提示近期有單純皰疹病毒感染。