1 概述
血小板在血栓形成和止血過程中起着關鍵作用。臨牀研究表明,許多疾病的發生都與血小板活化有關,血小板在活化過程中,不僅形態和生化代謝發生改變,其膜蛋白的結構和組分也發生變化。血小板α-顆粒膜蛋白(α-granule membrane protein-140,GMP-140)是血小板活化釋放的特異標誌之一,可反映體內血小板的活化程度及血栓形成傾向,爲人類血栓性疾病的早期診斷、治療提供了一條新的途徑,對其它疾病的診斷也具有重要的價值。
3 顆粒膜蛋白-140的醫學檢查
3.1 檢查名稱
3.2 分類
3.3 化驗取材
3.4 顆粒膜蛋白-140的測定原理
血小板在誘導劑刺激下,α-顆粒膜蛋白GMP-140整合到活化血小板漿膜上,成爲血小板活化的標記。利用放射性核素標記的抗GMP-140單克隆抗體直接測定血小板表面GMP-140的含量,以反映體內外血小板的活化程度。
3.5 試劑
(2)固定劑:20mmol/L戊二醛-3mmol/L疊氮鈉-PBS,pH7.4。
(3)洗滌液或抗體稀釋液:50μmol/LBSA-PBS(pH7.4)。
3.6 操作方法
用塑料注射器抽取靜脈血,以9∶1(V/V)的0.73mol/L EDTA-Na2抗凝,取0.5ml抗凝血與等量的固定劑混合。室溫放置30min,即爲固定的全血。以洗滌液調血小板數爲2.5×106/L,取100μl固定全血(2.5×106血小板),用洗滌液洗滌1次,加入50μl(0.1μg/管)125Ⅰ-SZ-51抗體,充分混勻,室溫30min。而非特異吸附以100倍未標記的SZ-51抗體同時加入反應管,以洗滌液洗3次。每個測定管均爲復管,將特異結合在血小板上的cpm換算成每個血小板上GMP-140的分子數(假定1個抗體分子與1個GMP-140分子結合)。
3.7 正常值
單克隆抗體SZ-51測定法:平均分子數:720.63~1148.57。
3.8 化驗結果臨牀意義
(2)一般升高:流行性出血熱多尿期。
3.9 附註
血小板計數要精確,它直接影響測定結果。本法批內CV 6.2%,批間CV 8.8%。