1 概述
抗中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）是存在於血液中的一種自身抗體，現已證實該抗體是一組系統性壞死性血管炎的血清標誌抗體，對血管炎的診斷、分類、鑑別診斷以及預後評估都具有十分重要的意義。以下介紹間接免疫熒光檢測法。
3 抗中性粒細胞胞漿抗體的醫學檢查
3.1 檢查名稱
3.2 分類
3.3 抗中性粒細胞胞漿抗體的測定原理
系統性壞死性血管炎患者的血清中存在一種與中性粒細胞胞漿中的原始顆粒和溶酶體起反應的自身抗體，用間接免疫熒光法可以檢出。
3.4 試劑
（3）復染液：①%溴乙錠：溴乙錠1g加水100ml。②1%伊文斯藍：伊文斯藍1g加水100ml。
3.5 操作方法
（1）中性粒細胞的製備：取健康人肝素抗凝血加等量1.5% Dextran-T500生理鹽水液混和，斜置室溫46min，吸取上層血漿加在含淋巴細胞分離液的試管內，3000r/min離心10min，取沉澱在底部的中性粒細胞層，用冷蒸餾水溶解殘留的紅細胞1min後，加等量1.8%氯化鈉恢復等滲，並用含0.5%人血清白蛋白的0.01mol/L PBS（pH值7.4）洗滌3次，每次靜置10min後再以3000r/min離心5min，最後用同一溶液調中性粒細胞濃度爲（4.5～5.5）×104/ml，取該細胞懸液塗成薄片，加無水乙醇置4℃固定5min，待自然乾燥後，置－20℃備用。
（2）正式試驗
①用0.01mol/L：PBS（pH值7.4）將被檢血清作1∶20稀釋後，滴加於上述細胞基質片上，並使鋪展覆蓋全部細胞塗片，放溼盒內置37℃溫育30min後，用0.01mol/L PBS（pH值7.4）洗滌8次，每次10min，甩幹。
②滴加適度稀釋的羊抗人IgG的F（ab）2＇熒光抗體，同法溫育、洗滌、甩幹。
③取1%溴乙錠200μl加於PBS（pH值7.4）100ml中，用以着染細胞核5min後，洗滌1次。
④取1%伊文斯藍200μl加於PBS（pH值7.4）100ml中，用以復染細胞漿5min後，洗滌1次。
⑤滴加90%甘油-PBS液，加蓋玻片封片固定，用熒光顯微鏡觀察結果。
⑥結果判斷，因具有抗原性的原始顆粒和溶酶體在中性粒細胞胞漿中有其不同的成分和分佈特徵，因此可呈現特殊的熒光類型，包括胞漿型（cANCA），和細胞核周圍型（pANCA）兩種。A.胞漿型：中性粒細胞胞漿呈均一瀰漫亮綠色熒光，細胞核染暗紅色，是爲胞漿陽性。B.核周圍型：中性粒細胞核周圍有亮綠色熒光出現，爲核周圍型陽性。C.中性粒細胞胞漿呈淡紅色，核着暗紅色則爲陰性。
3.6 正常值
3.7 化驗結果臨牀意義
韋格納肉芽腫（UG）及多血管炎組患者由於病程進展較快易導致呼吸和腎功能衰竭，以往診斷主要靠典型的臨牀症狀和組織學特徵。1982年Davies等人建立了本法，繼而Wonde等又作了分型，從而提高該組疾病的診斷水平，且發現WG和多血管炎組患者該抗體陽性率明顯高於其他自身免疫病。該抗體在該組疾病緩解期可呈滴度下降或轉陰，故有助於療效觀察。
3.8 附註
凡發現細胞核周圍型抗體陽性，應用HEP-2細胞法測定抗核抗體，藉以與抗核抗體周邊型相鑑別。