WS/T 635—2018 尿中砷形態測定 液相色譜-原子熒光法

化驗及醫學檢查 衛生標準 中華人民共和國衛生行業標準 尿中砷形態測定

医学百科APP 扫码下载

您的医学知识库 + 健康测试工具

https://www.wiki8.cn/app/

1 拼音

W S / T 6 3 5 — 2 0 1 8 niào zhōng shēn xíng tài cè dìng yè xiāng sè pǔ - yuán zǐ yíng guāng fǎ

2 基本信息

ICS 11.020

C 61

中華人民共和國衛生行業標準WS/T 635—2018《尿中砷形態測定 液相色譜-原子熒光法》(Determination of urinary arsenic speciation —liquid chromatography-atomic fluorescence spectrometry)由中華人民共和國國家衛生健康委員會於2018年09月17日《關於發佈推薦性衛生行業標準〈尿中砷形態測定 液相色譜-原子熒光法〉的通告》(國衛通〔2018〕17號)發佈,自2019年03月01日起實施。

3 發佈通知

關於發佈推薦性衛生行業標準《尿中砷形態測定 液相色譜-原子熒光法》的通告

國衛通〔2018〕17號

現發佈推薦性衛生行業標準《尿中砷形態測定  液相色譜-原子熒光法》,編號和名稱如下:

WS/T 635—2018 尿中砷形態測定 液相色譜-原子熒光

該標準自2019年3月1日起施行。

特此通告。

國家衛生健康委員會2018年9月17日

4 前言

本標準按照 GB/T 1.1—2009 給出的規則起草。

本標準起草單位:北京市疾病預防控制中心、重慶市疾病預防控制中心、廣東省疾病預防控制中心、安徽省疾病預防控制中心、北京朝陽醫院、山西省疾病預防控制中心。

本標準主要起草人:劉麗萍、王小豔、張妮娜、張潔、王晶、韋瑩、李惠玲、郭舒崗、陳紹佔、戴銳睿。

5 標準正文

尿中砷形態測定 液相色譜-原子熒光

5.1 1 範圍

本標準規定了測定尿中砷形態(亞砷酸鹽[As(III)]、砷酸鹽[As(V)]、一甲基砷(MMA)和二甲基砷(DMA))的液相色譜-原子熒光法。

本標準適用於尿中砷形態(亞砷酸鹽[As(III)]、砷酸鹽[As(V)]、一甲基砷(MMA)和二甲基砷(DMA))的測定。

5.2 2 規範性引用文件

下列文件對本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用於本文件。

凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用於本文件。

GB/T 6682 分析實驗室用水規格和試驗方

5.3 3 原理

尿樣按一定比例稀釋後,以液相色譜進行分離分離後的目標化合物在酸性介質下與硼氫化鉀(KBH4)反應,生成氣態砷化合物,用原子熒光光譜儀進行測定,保留時間定性,以峯高或者峯面積繪製標準曲線法定量。

5.4 4 儀器

4.1 玻璃器皿均需以硝酸溶液(1+4)浸泡 24 h,用水反覆沖洗,最後用純水沖洗乾淨。

4.2 液相色譜—原子熒光光譜聯用儀。

4.3 pH 計(精度 0.01)。

4.4 電子天平(感量 0.1 mg)。

4.5 超聲波清洗器

4.6 離心機,轉速≥8000 r/min。

4.7 純水製備儀。

5.5 5 試劑

5.1 實驗用水及試劑要求:除非另有說明,本方法所用試劑均爲優級純,純水爲 GB/T 6682 規定的一級水。

5.2 鹽酸(HCl,ρ=1.19 g/mL)。

5.3 氫氧化鉀(KOH)。

5.4 硼氫化鉀(KBH4)。

5.5 磷酸氫二銨[(NH4)2HPO4]。

5.6 甲酸(HCOOH,99 %)。

5.7 標準物質:亞砷酸根(AsO33-),砷酸根(AsO43-),一甲基砷(CH4AsO3-),二甲基砷(C2H6AsO2-)均爲有證標準物質

5.6 6 試劑配製

5.6.1 6.1 載流,鹽酸溶液(7+93)

量取 70 mL 鹽酸,用純水稀釋至 1000 mL。

5.6.2 6.2 還原劑(20 g/L 硼氫化鉀溶液-3.5 g/L 氫氧化鉀溶液

稱取 3.5 g 氫氧化鉀溶解於 900 mL 純水中混勻,加入 20 g 硼氫化鉀,用純水稀釋至 1000 mL,混勻。

5.6.3 6.3 甲酸溶液(10+90)

量取 10 mL 甲酸用純水稀釋至 100 mL。

5.6.4 6.4 流動相(15 mmol/L 磷酸氫二銨溶液

稱取 1.98 g 的磷酸氫二銨溶解於 1000 mL 純水中,用甲酸溶液(10+90)調節 pH 至 6.0,超聲脫氣5 min,備用。

5.6.5 6.5 砷形態標準溶液配製

6.5.1 砷形態標準儲備溶液[ρ(As)=10.0 mg/L]:分別準確稱取適量亞砷酸根、砷酸根、一甲基砷、二甲基砷四種砷形態標準物質,用純水配製成含砷濃度爲 10.0 mg/L 的砷形態單標標準儲備溶液,置於 4 ℃冰箱中保存

6.5.2 砷形態混合標準溶液[ρ(As)=1.0 mg/L]:分別準確移取 10.0 mg/L 的四種砷形態單標標準儲備溶液1.00 mL 置於 10 mL 容量瓶中,用純水定容至刻度,現用現配。

6.5.3 砷形態混合標準使用系列溶液[ρ(As)=0~100.0 µg/L]:分別準確移取一定量的 1.0 mg/L 砷形態混合標準溶液,用純水逐級稀釋成 0.0 µg/L、2.0 µg/L、5.0 µg/L、10.0 µg/L、50.0 µg/L、100.0 µg/L 四種砷形態混合標準系列使用溶液,現用現配。

5.7 7 樣品收集、運輸和保存

收集不少於 10 mL 尿液,置於潔淨的聚丙烯塑料玻璃試管中,嚴密封口以防蒸發。現場收集尿樣後,在 4 ℃下保存運輸;樣品應該儘快測定,在 4 ℃下可保存 30 d。

5.8 8 分析步驟

5.8.1 8.1 試樣的前處理

取 1mL 均勻的尿樣用純水稀釋 3 倍,用 0.45 µm 水系濾膜過濾後上機測定。如果尿樣中有沉澱,先將尿樣離心 10 min(8000 r/min),取一定量的上清液按以上方法測定。如果樣品中砷形態濃度超過標準曲線上限,則將尿樣按一定比例稀釋後測定。

5.8.2 8.2 液相色譜參考條件

8.2.1 色譜柱條件:陰離子交換色譜柱(柱長 250 mm,內徑 4.1 mm),或等效柱。陰離子交換色譜保護柱(柱長 25 mm,內徑 2.3 mm),或等效柱。

8.2.2 流動相組成:15 mmol/L 磷酸氫二銨溶液(pH=6.0)作爲流動相,1.0 mL/min 流速洗脫,進樣體積爲 100 µL。

5.8.3 8.3 原子熒光檢測參考條件

原子熒光檢測參考條件如下:

——光電倍增管負高壓:280 V;

——砷空心陰極燈總電流:90 mA;

——輔陰極燈電流:40 mA;

——原子化方式:火焰原子化;

——原子化器溫度:中溫;

——氬載氣流量:300 mL/min;

——氬屏蔽氣流量:600 mL/min;

——還原劑:20 g/L 硼氫化鉀溶液-3.5 g/L 氫氧化鉀溶液

——載流:鹽酸溶液(7+93)。

5.8.4 8.4 標準曲線的測定

分別吸取 100 µL 四種砷形態的混合標準使用系列溶液,依次注入液相色譜-原子熒光光譜聯用儀進行分離檢測,得到色譜圖,以保留時間定性。以標準系列溶液中砷形態的濃度爲橫座標,以色譜峯高或峯面積爲縱座標,繪製標準曲線。標準溶液色譜圖見附錄 A 中圖 A.1。

5.8.5 8.5 試樣溶液的測定

吸取 100 µL 試樣溶液注入液相色譜—原子熒光光譜聯用儀進行分析,得到色譜圖,以保留時間定性。根據標準曲線得到試樣溶液中砷形態的含量。試樣溶液色譜圖見圖 A.2。

5.9 9 分析結果的計算

尿樣中砷形態[As(III)、As(V)、MMA、DMA]的含量(以砷計)按式(1)計算:

Xi=(Ci- C0)·K ………………………(1)

式中:

Xi——尿樣中砷形態的含量(以砷計),單位爲微克每升(µg/L);

Ci——由標準曲線查得的試樣溶液中砷形態的濃度(以砷計),單位爲微克每升(µg/L);

C0——由標準曲線查得的現場空白中砷形態的濃度(以砷計),單位爲微克每升(µg/L);

K——尿樣稀釋倍數。

5.10 10 方法特性

5.10.1 10.1 檢出限

方法中亞砷酸鹽、一甲基砷、二甲基砷檢出限均爲 0.5 µg/L,定量限爲 1.5 µg/L;砷酸檢出限爲 0.8 µg/L,定量限爲 2.4 µg/L。

5.10.2 10.2 精密度

6個實驗室對含砷形態爲6.0 μg/L~400.0 μg/L的尿樣進行6次重複測定,相對標準偏差均小於5.0%。

5.10.3 10.3 準確度

採用尿中砷形態成分標準物質及加標回收考察方法準確性,6 個實驗室測定的不同濃度的樣品加標回收率在 80%~120%之間。

5.11 11 質量保證質量控制要點

11.1 實驗環境、器皿、試劑、採樣及運輸過程應避免砷污染

11.2 每次樣品測定時均應配製和測定標準系列,標準曲線迴歸方程的相關係數絕對值應≥0.998。

11.3 推薦採用平行樣品、凍幹人尿中砷形態成分標準物質及加標回收作爲質量控制手段。

11.4 隨樣品採集同時進行空白採集。

6 附錄A(資料性附錄)砷形態標準溶液試樣溶液色譜圖

A.1 砷形態標準溶液色譜圖

10 µg/L 亞砷酸[As(III)],二甲基砷(DMA),一甲基砷(MMA),砷酸[As(V)]標準溶液色譜圖,見圖 A.1。

圖.png

圖 A.1 砷形態標準溶液(10 µg/L)色譜圖

A.2 試樣溶液色譜圖

試樣溶液色譜圖見圖 A.2

圖.png

圖 A.2 試樣溶液中砷形態色譜圖

特別提示:本站內容僅供初步參考,難免存在疏漏、錯誤等情況,請您核實後再引用。對於用藥、診療等醫學專業內容,建議您直接咨詢醫生,以免錯誤用藥或延誤病情,本站內容不構成對您的任何建議、指導。